[发明专利]一种重组蛋白的编码序列、重组蛋白及其单克隆抗体的制备方法在审
| 申请号： | 201710111412.6 | 申请日： | 2017-02-28 |
| 公开（公告）号： | CN106834319A | 公开（公告）日： | 2017-06-13 |
| 发明（设计）人： | 李晓照;冯俊涛;胡新月;李昆;罗丽莎;胡祥叶;吴琼杉;余铭恩;朱世荣;唐薇 | 申请（专利权）人： | 中南大学湘雅医院 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C07K19/00;C12N15/70;C07K16/44 |
| 代理公司： | 长沙正奇专利事务所有限责任公司43113 | 代理人： | 卢宏,周栋 |
| 地址： | 410008 湖*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 蛋白 编码 序列 及其 单克隆抗体 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种重组蛋白的编码序列，其特征在于，所述编码序列如SEQ ID NO.1所示。
2.如权利要求1所述编码序列编码的重组蛋白，其特征在于，所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种重组蛋白表达载体，其特征在于，所述重组蛋白表达载体是含有SEQ ID NO.1所示编码序列的质粒载体。
4.如权利要求2所述重组蛋白在制备标签蛋白单克隆抗体中的应用。
5.如权利要求3所述重组蛋白表达载体在制备标签蛋白单克隆抗体中的应用。
6.一种标签蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
(1)合成SEQ ID NO.1所示的重组蛋白编码序列，并将该重组蛋白编码序列连接质粒载体，进而构建重组蛋白表达载体；
(2)将重组蛋白表达载体转化大肠杆菌，筛选得到重组蛋白表达菌株；
(3)将重组蛋白表达菌株大规模培养后，经纯化获取重组蛋白，所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；
(4)将重组蛋白多次免疫Balb/c小鼠，取小鼠脾脏细胞与sp2/0骨髓瘤细胞融合，经过多轮筛选和多指标鉴定分别获得针对重组蛋白所对应的标签蛋白单克隆细胞株，再由标签蛋白单克隆细胞株制得标签蛋白单克隆抗体。
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