[发明专利]一种磁珠法核酸提取方法

权利要求书

1.一种磁珠法核酸提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、在生物样品中加入裂解缓冲液，裂解分离出所述生物样品中的核酸DNA/RNA；所述核酸DNA/RNA与所述裂解缓冲液中的纳米磁珠结合，在外部磁场作用下，形成磁珠-核酸复合物；

S2、向所述磁珠-核酸复合物中加入洗涤缓冲液，在预设转速和预设时间下将所述磁珠-核酸复合物中进行离心洗涤，去除磁珠-核酸复合物上的杂质，收集洗涤后的磁珠-核酸复合物；重复离心洗涤一次；

S3、向所述洗涤后的磁珠-核酸复合物中加入洗脱缓冲液，并加入去抑制剂；直接将磁珠-核酸复合物和洗脱缓冲液的混合物进行后续的荧光定量PCR反应。

2.如权利要求1所述的磁珠法核酸提取方法，其特征在于：

所述裂解缓冲液中的高浓度盐包括以下成分：2-3M盐酸胍、1-3M碘化钠和5-10mM EDTA；

所述裂解缓冲液还包括以下成分：1-2％曲拉通X-100，1-2％吐温-20，1-2％SDS，30-40％糖原，5-10％磁珠；

所述裂解缓冲液的PH值＝7.4。

3.如权利要求1所述的磁珠法核酸提取方法，其特征在于：

所述洗涤缓冲液包括以下成分：5-10mM EDTA，10-50mM Tris-HCl，75％乙醇；

所述洗涤缓冲液的PH值＝6.4。

4.如权利要求1所述的磁珠法核酸提取方法，其特征在于：

所述洗脱缓冲液采用1×TE。

5.如权利要求1所述的磁珠法核酸提取方法，其特征在于：

所述纳米磁珠为超顺磁性氧化硅纳米磁性微珠，所述纳米磁珠直径为20-100nM。

6.如权利要求1所述的磁珠法核酸提取方法，其特征在于：

所述去抑制剂包括聚氧乙烯醚Brij58，甘油醛-3-磷酸，磷酸二羟丙酮的一种或多种组合。

7.如权利要求1～6中任意一项所述的磁珠法核酸提取方法，其特征在于：

所述生物样品包括有细胞液体样品和无细胞液体样品。

8.如权利要求7所述的磁珠法核酸提取方法，其特征在于：

所述有细胞液体样品包括细胞、全血、动物组织匀浆液。

9.如权利要求7所述的磁珠法核酸提取方法，其特征在于：

所述无细胞液体样品包括血清、血浆、组织提取液、拭子洗液、尿液、病毒培养液。