[发明专利]一种流感病毒株及其应用

说明书

本发明涉及一种流感病毒株，其保藏号为CGMCC No.13784。所述流感病毒株在野生型流感病毒株的M2基因编码区的第78nt后面插入了15nt的序列，如SEQ ID No.2所示。所述流感病毒株的M基因序列，如SEQ ID No.1所示。本发明还涉及上述流感病毒株在制备用于预防和/或治疗流感的疫苗中的应用。本发明的目的在于得到一种流感病毒株，并将其应用于疫苗的生产。

技术领域

本发明涉及病毒领域，具体涉及一种流感病毒株及其应用。

背景技术

流感病毒（influenza virus）的基因组由8个单链RNA片断组成，编码11种蛋白，属于正粘病毒科流感病毒属。流感病毒分为A、B、C 三型，A、B 两型为人群中流行的常见类型，并能引起世界性大流行，但 A 型流感病毒感染范围更广，危害更大。流感病毒的8个基因组片断按分子量由大到小顺序依次为PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS基因，这些基因片段编码的11种病毒蛋白中有8个是病毒结构蛋白（HA、NA、NP、M1、M2、PB1、PB2和 PA）； NS 基因编码的 NS1和 NS2为两个非结构蛋白；两种主要表面糖蛋白：血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）为流感病毒主要表面抗原。根据HA 和NA 的不同，A 型流感病毒又分为不同亚型，目前己鉴定出9种 NA 亚型和16种 HA 亚型。

流感病毒能够引起严重的呼吸道疾病，传染性很强，容易诱发其他严重并发症。已发生多次世界性大流行，给人类生命健康带来了极大危害。由于病毒表面蛋白HA和 NA 易发生变异，能够产生抗原漂移（antigenic drift）和抗原转换（antigenic shift）两种突变形式，尤其近年来在世界及中国出现的H1N1和H7N9等流感病毒突变株的爆发和流行在全球一体化背景下给疾病的防控带来了更多困难，随着交流越来越频繁，病毒发生重组或重配的频率也随之增加，对于新型突变株的预测也会更加困难，不仅给各国、各地区造成巨大经济损失，给人们健康和生命安全带来了极大威胁，更是加大了对疾病的防控难度。

接种疫苗是当前预防流感病毒大流行的最有效手段。现在广泛使用的流感疫苗设计主要针对病毒的HA和NA蛋白，以HA和NA作为靶抗原诱导机体产生免疫保护，目前已批准应用于人体的灭活病毒疫苗是由对人类危害较大的两种甲型流感病毒（H1N1和H3N2）和一种乙型流感病毒组成的三价灭活疫苗。虽然针对HA和NA设计的灭活全病毒疫苗安全性较高、抗原组分齐全、免疫原性强，能够抵抗同亚型流感病毒的攻击，提供良好的免疫保护。但当前疫苗在流感病毒流行和爆发期间的防治效果并不非常理想，一方面和病毒本身的特点具有重要的关系，同时疫苗设计方法、研发策略和保护效果等也有着直接的影响。首先流感病毒的HA和NA蛋白易发生抗原漂移或转变，新疫苗的生产要随着流行毒株的变异而及时更新，病毒疫苗株的选育费时费力，生产周期长、成本高，难以适应防控流感大流行的需要。其次灭活疫苗难以对病毒的感染产生完全充分的免疫保护，无法有效的刺激细胞免疫反应，因此选择疫苗设计的合适靶抗原、加快候选疫苗株的高效筛选及充分提高疫苗的免疫保护效果是当前流感疫苗研究中非常关键和急需解决的问题。

流感病毒疫苗靶抗原选择中，除了病毒表面HA和NA蛋白外，基质蛋白M也被众多学者广泛报道，M蛋白由病毒RNA节段7编码，含1027个核苷酸，包括非糖基化结构蛋白M1和M2。M1和M2编码区部分重叠，但具有不同的开放读码框架，M1蛋白由252个氨基酸编码，M2蛋白编码区包括核苷酸26～51和740～1007，编码97个氨基酸。M1形成二聚体，结合病毒RNA和囊膜，在病毒核衣壳组装时发挥作用。M1变异率低、具有型特异性，抗原的差异是病毒分型的依据之一。M2蛋白是流感病毒膜蛋白之一，甲型流感病毒包膜上低密度表达，在感染细胞胞膜上分布广泛。M2蛋白以同源四聚体形式存在内脂膜上，具有质子泵作用，通过控制质子通道活性调节病毒内的pH 值，影响流感病毒的复制。由于M2 蛋白是除HA、NA外的第三种跨膜蛋白，在人类A 型流感病毒中高度保守。M2蛋白作为具有交叉保护能力的“通用流感疫苗”（universal influenza vaccine）候选靶抗原，已成为目前流感病毒通用疫苗研究的热点。