[发明专利]一种采用膜分离技术制备高纯度雷公藤甲素的方法

说明书

本发明公开了一种采用膜分离技术分离雷公藤甲素的方法，以乙醇溶液为溶剂提取的雷公藤为原料，经粗过滤，再用适当的膜进行分离除杂,去除大分子杂质后得雷公藤甲素粗品，进一步浓缩，过一次硅胶柱，即可得纯度为99%以上的雷公藤甲素无色针状结晶产品。本发明取代了传统工艺中先用大量有机溶剂进行萃取后再多次过柱层析的方法，简化了工艺，可常温分离，对热敏性物质不会产生破坏，并大量节约有毒的有机溶剂，保护环境，降低生产成本，且收率高，安全可靠，具有很强的经济竞争力，符合国家倡导的绿色发展中药理念。

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种采用膜分离技术制备高纯度雷公藤甲素的方法。

背景技术

雷公藤（拉丁学名Tripterygium wilfordii Hook. f.），又叫黄藤、黄腊藤、菜虫药等，是一个有着悠久、广泛应用历史的中药。为卫矛科雷公藤属植物雷公藤的根。本品味苦、辛，性凉，大毒。归肝、肾经。功效祛风除湿、通络止痛、消肿止痛、解毒杀虫。用于湿热结节、癌瘤积毒，临床上用其治疗麻风反应、类风湿性关节炎等，有抗肿瘤、抗炎等作用。雷公藤的主要成分为二萜类、三萜类及生物碱类。

雷公藤甲素又称雷公藤内酯、雷公藤内酯醇，是从卫矛科植物雷公藤中提取的一种环氧二萜内酯化合物，为雷公藤提取物的主要活性成分，研究表明它具有抗氧化，抗类风湿，抗老年性痴呆症、抗癌等功效。雷公藤甲素作为单一成分可以很好控制剂量，也可作为结构改造的嵌体，其需求量越来越大。

但是雷公藤甲素在雷公藤中的含量极低，目前主要采用药材经多次萃取，常压反复过硅胶柱层析进行分离，得率也很低，据文献报道，植物分离得率仅为0.001%，而且提取分离过程中有毒溶剂消耗大，对操作人员毒性也很大。目前的工艺普遍存在工艺复杂、耗时长、成本高、对环境污染大等缺陷。

发明内容

针对现有技术的缺点，本发明提供一种采用膜分离技术制备高纯度雷公藤甲素的方法，该方法能快速分离且可提高雷公藤甲素收率，而且工艺简单，便于实施，降低了生产成本，对环境的污染非常少，能保护操作人员的人身安全，提高了提取效率和收率，具有很强的经济竞争力。

实现本发明目的的技术方案是：

一种采用膜分离技术制备高纯度雷公藤甲素的方法，包括如下步骤：

1）醇提：将雷公藤药材粉碎成30～50目，按质量比加入5～10倍的浓度为70%～85%乙醇溶液，回流提取2～3次，每次3～5小时，过滤，合并提取液，得到雷公藤提取液；

2）浓缩：将步骤2）中的雷公藤提取液浓缩至原有体积的1/3～1/5得到相对密度为1.05～1.08的雷公藤浓缩液；

3）离心：将步骤3）中获得的雷公藤浓缩液放置在转速为3000～4000转/分的离心机上离心，收集上清液；

4）精滤：将步骤3）中获得的上清液，使用滤芯为200nm陶瓷膜进行过滤，获得精滤液，

超滤：将步骤4）中获得的精滤液，用压力为0.50～1.0MPa的泵打循环，再经1000分子量的超滤膜过滤并截留，得雷公藤透析液。

5）柱层析：将步骤5）中获得的雷公藤透析液浓缩至干，获得雷公藤透析液浸膏，在浸膏中加入有机溶剂溶解，干法拌样后，在常压的情况下，使用目数为200～300目的硅胶柱进行柱层析，采用湿法装柱的方式，用乙酸乙酯/石油醚混合溶剂洗脱，收集洗脱液；

所述的步骤6）中的有机溶剂为二氯甲烷或者乙酸乙酯，

所述的乙酸乙酯/石油醚混合溶剂的体积比为1～5∶1；

6）结晶：将步骤6）中的洗脱液浓缩至干，得到雷公藤甲素粗品，在雷公藤甲素粗品中，加入有机溶剂溶解，（充分搅拌后），在温度2～8℃的环境中静置析晶，静置析晶的时间为8～14小时，所得无色针状结晶的雷公藤甲素，以此方法获得的雷公藤甲素的纯度为99%；