[发明专利]一种将非神经元细胞转化为神经元细胞的方法有效
申请号: | 201710117871.5 | 申请日: | 2017-03-01 |
公开(公告)号: | CN108531453B | 公开(公告)日: | 2020-12-18 |
发明(设计)人: | 周琪;李伟;胡宝洋;何正泉;王柳;郝捷 | 申请(专利权)人: | 中国科学院动物研究所 |
主分类号: | C12N5/0793 | 分类号: | C12N5/0793;A61K45/00;A61K31/4745;A61P35/00;A61P25/00 |
代理公司: | 北京彩和律师事务所 11688 | 代理人: | 闫桑田 |
地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 神经元 细胞 转化 方法 | ||
1.一种将非神经元细胞转分化为神经元细胞的方法,其特征在于所述方法包括对所述非神经元细胞的胞外基质-骨架系统进行干扰处理,
其中所述干扰处理为:采用细胞骨架蛋白抑制剂进行处理,
其中所述细胞骨架蛋白抑制剂为:肌球蛋白(myosin)抑制剂,
其中所述肌球蛋白(myosin)抑制剂为:(-)-Blebbistatin,
其中所述非神经元细胞为成纤维细胞或神经胶质细胞。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述肌球蛋白(myosin)抑制剂浓度为10μM 以上,其中所述浓度为所述肌球蛋白(myosin)抑制剂在处理非神经元细胞所用诱导培养基中的浓度。
3.根据权利要求1所述的方法,其中所述肌球蛋白(myosin)抑制剂浓度为20μM 以上,其中所述浓度为所述肌球蛋白(myosin)抑制剂在处理非神经元细胞所用诱导培养基中的浓度。
4.根据权利要求1所述的方法,其中所述肌球蛋白(myosin)抑制剂浓度为10-30μM,其中所述浓度为所述肌球蛋白(myosin)抑制剂在处理非神经元细胞所用诱导培养基中的浓度。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法,其中,
在所述干扰处理为采用细胞骨架蛋白抑制剂进行处理时,
所述方法还包括将非神经元细胞置于诱导培养基中培养3-7天,然后采用成熟培养基培养7-14天。
6.根据权利要求5所述的方法,其中所述诱导培养基包含:(-)-Blebbistatin、N2细胞培养基添加剂,B27细胞培养基添加剂,谷氨酰胺,β巯基乙醇。
7.根据权利要求5所述的方法,其中所述成熟培养基包含:N2细胞培养基添加剂,B27细胞培养基添加剂,谷氨酰胺,β巯基乙醇,神经营养素-3(NT3),脑源性神经营养因子(BDNF),胶质细胞系衍生的神经营养因子(GDNF),二丁酰环腺苷酸(db-cAMP)。
8.(-)-Blebbistatin用于将成纤维细胞或神经胶质细胞转分化为神经元细胞的用途。
9.(-)-Blebbistatin在制备将成纤维细胞或神经胶质细胞转分化为神经元细胞的试剂盒中的用途。
10.根据权利要求9所述的用途,其中所述(-)-Blebbistatin的浓度为10μM 以上,其中所述浓度为所述(-)-Blebbistatin在诱导培养基中的浓度。
11.根据权利要求9所述的用途,其中所述(-)-Blebbistatin的浓度为20μM 以上,其中所述浓度为所述(-)-Blebbistatin在诱导培养基中的浓度。
12.根据权利要求9所述的用途,其中所述(-)-Blebbistatin浓度为10-30μM,其中所述浓度为所述(-)-Blebbistatin在诱导培养基中的浓度。
13.根据权利要求10-12中任一项所述的用途,其中所述诱导培养基还包含:N2细胞培养基添加剂,B27细胞培养基添加剂,谷氨酰胺,β巯基乙醇。
14.根据权利要求9所述的用途,其中,所述试剂盒还包括成熟培养基。
15.根据权利要求14所述的用途,其中所述成熟培养基包含:N2细胞培养基添加剂,B27细胞培养基添加剂,谷氨酰胺,β巯基乙醇,神经营养素-3(NT3),脑源性神经营养因子(BDNF),胶质细胞系衍生的神经营养因子(GDNF),二丁酰环腺苷酸(db-cAMP)。
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