[发明专利]一种检测动物内脏中头孢菌素类药物残留的方法及其样品前处理方法

说明书

本发明公开了一种检测动物内脏中20种头孢菌素类药物残留的方法及其样品前处理方法。前处理方法包括：(1)取待检测样品，加入提取溶剂对所述待测样品进行提取；(2)离心得上清液；(3)取所述上清液加载到固相萃取小柱上净化，收集得第一流出液；(4)待第一流出液收集完毕，再取提取溶剂加载到所述固相萃取小柱上，收集得第二流出液，合并全部流出液；(5)将所述全部流出液经浓缩、复溶和过滤步骤，得到待测样液。本发明还公开了样品经前处理后通过液‑质联用检测头孢菌素残留的方法。该方法具有快速、高效、检出限低、重现性好的特点，适于对抗生素的痕量检测。

技术领域

本发明属于食品检测领域，具体涉及一种检测动物内脏中头孢菌素类药物残留的方法，以及适用的样品前处理方法。

背景技术

头孢菌素类抗生素是一类具有β-内酰胺环的半合成抗生素，自20世纪60年代初发明以来，由于其具有抗菌谱广、抗菌力强、毒副作用小、过敏反应少等特点，是目前世界上应用最为广泛，且发展最为迅速的一类抗感染药物，现已有第1至第4代头孢菌素类药物共60多种，被广泛应用于国内外临床。同时一些头孢类抗生素也逐步用于兽药中，用其治疗呼吸疾病、细菌感染等，从而不可避免地引起动物组织或其产品中的残留，对人类健康造成危害。目前，该类药物在动物源食品中的残留问题已引起了各国高度重视，中国、日本、美国、欧盟等国都已规定了动物源性食品中头孢菌素类药物残留的最大残留限量，严格控制头孢菌素类抗生素在畜牧业中的应用。其中日本最为严格，对动物肌肉组织中7种头孢菌素类药物(头孢匹林、头孢噻呋、头孢氨苄、头孢洛宁、头孢唑林、头孢喹诺、头孢呋辛)制定了最高残留限量，我国也规定了3种头孢类药物的最高残留限量。为满足进出口贸易中日趋严格的残留限量检测要求，具备一种高效、准确、灵敏度高的头孢类药物残留检测的方法尤为必要。

目前，国内外对动物源食品中头孢类抗生素的检测技术已有少量报道，但仍存在一些不足。一是涵盖头孢种类较少，在现有的国内外文献中β-内酰胺类抗生素的检测方法多针对青霉素类,头孢类定量分析方法很少,且不成体系，只能同时检测头孢氨苄、头孢匹林、头孢唑林等少数几种头孢药物残留，不能满足对多种头孢类药物同时检测的实际需求。二是涉及的样品基质简单，多集中在动物肌肉组织或牛奶中头孢类残留的测定，对于基质复杂的动物内脏组织少有涉及。三是现有的头孢类药物检测方法中样品前处理步骤复杂，时间过长，尤其是在内脏组织中一些头孢类化合物易降解为代谢物，从而导致待测化合物回收率偏低。因此，亟需开发出一种快速检测头孢类药物的样品前处理方法，尤其是适用于液-质联用检测的高效灵敏的样品前处理的方法，以满足日趋严格的头孢类药物残留限量检测要求。

发明内容

本发明的目的在于现有技术中对动物源食品中头孢菌素类药物进行检测时采用的样品前处理方法耗时长、涵盖头孢种类较少、基质单一，进而提供一种适用于同时、快速检测动物内脏中20种头孢菌素类化合物的样品前处理方法，尤其是适用于液-质联用检测的样品前处理方法。

本发明的另一个目的在于提供一种能够快速检测出动物内脏中头孢菌素类药物的方法。

为达到上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明提供了一种检测动物内脏中20种头孢菌素类药物残留的样品前处理方法，其包括下述步骤：

(1)取待检测样品，加入提取溶剂对所述待测样品进行提取，所述提取溶剂为乙腈和水的混合溶液；

(2)离心，得上清液；

(3)取上清液加载到固相萃取小柱上净化，收集得第一流出液；所述固相萃取小柱为PRiME HLB固相萃取小柱；

(4)待第一流出液收集完毕，再取所述提取溶剂加载到所述固相萃取小柱上，收集得第二流出液，合并全部流出液；

(5)将所述全部流出液经浓缩、复溶和过滤步骤，得到待测样液。