[发明专利]微小RNA及其在制备抗日本血吸虫感染制剂中的应用

说明书

本发明提供了微小RNA及其在制备抗日本血吸虫感染制剂中的应用。具体地，本发明提供了对血吸虫有显著杀灭或抑制作用的核酸抑制分子，尤其是微小RNA核酸分子。实验表明，本发明的特定amiRNA对于日本血吸虫(尤其是早期童虫)具有很高的杀灭或抑制能力。本发明还提供了所述核酸抑制分子的制法、药物组合物和应用。

技术领域

本发明涉及生物医药，具体地，涉及微小RNA及其在制备抗日本血吸虫感染制剂中的应用。

背景技术

血吸虫病是一种严重危害人类健康的寄生虫病。目前血吸虫病治疗仍以吡喹酮为主，但完全依赖单一药物治疗难以控制血吸虫病重复感染，且近年来研究发现吡喹酮化疗有诱导抗药性产生的潜在风险，因此开展血吸虫病新型疫苗和新药研发对血吸虫病有效控制乃至消除有重要的战略意义。非编码小核糖核酸广泛存在于真核生物中，长度一般为18-30个核苷酸(nucleotide,nt)，主要包含微小核糖核酸(microRNAs,miRNA)、小干扰核糖核酸(small interfering RNA,siRNA)、Piwi-相互作用核糖核酸(piRNA)等3类，是生物基因表达、基因组稳定和抵御外来遗传因子的关键调节因子。近年来研究者发现血吸虫不同发育阶段存在其特异性非编码RNA，这为深入研究血吸虫发育和寄生以及致病机制提供新的思路。

微小RNA的鉴定及发现将有利于发现潜在抗日本血吸虫药物靶标，为更深入了解日本血吸虫的生物学特征以及进一步发展日本血吸虫新药物研发提供新线索。

因此，本领域迫切需要开发一种可以有效杀灭或抑制血吸虫(尤其是日本血吸虫,)且副作用小的微小RNA药物。

发明内容

本发明的目的在于开发一种可以有效杀灭或抑制血吸虫(尤其是日本血吸虫)且副作用小的微小RNA药物。

本发明第一方面提供了一种核酸抑制分子，所述核酸抑制分子为单链或双链amiRNA，所述核酸抑制分子的正义链的5'至3'端具有式I所示的结构：

Z₀-Z₁-Z₂ (I)

其中，

Z₀＝A、T、C、G或无；

Z₁是如SEQ ID NO.：1、3、或5所示的核苷酸序列；和

Z₂＝A、T、C、G或无。

在另一优选例中，所述式I结构选自下组：SEQ ID NO.：1、3、5、或其组合。

在另一优选例中，所述的核酸抑制分子包括siRNA。

在另一优选例中，所述的核酸抑制分子的长度为16-50nt，较佳地16-30nt，更佳地16-25nt。

在另一优选例中，所述的核酸抑制分子为分离的、重组的、或人工合成的核酸分子。

本发明第二方面提供了一种产生本发明第一方面所述的核酸抑制分子的前体序列，所述前体序列正义链的5'至3'端具有式II所示的结构：

式中，

B1为所需要的第一核糖核苷酸序列，其中所述的第一核糖核苷酸序列包括amiRNA序列形式；

B2为与B1基本互补或完全互补的序列，且B2与C不互补；

C为茎环结构。

在另一优选例中，所述的B1或所述的amiRNA具有式I结构，或如式I所示。

在另一优选例中，所述B1的序列选自下组：SEQ ID NO.：1、3、5、或其组合。