[发明专利]用作酶联试剂盒包被抗原的麻疹病毒裂解液的制备方法在审
申请号: | 201710119967.5 | 申请日: | 2017-03-02 |
公开(公告)号: | CN107085095A | 公开(公告)日: | 2017-08-22 |
发明(设计)人: | 李华;邹昌勇;何卫华;龚华岳;韩晓娟;杨婷婷;王邦洲 | 申请(专利权)人: | 江苏华冠生物技术股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53 |
代理公司: | 江苏圣典律师事务所32237 | 代理人: | 龚拥军 |
地址: | 225300 江苏省泰州*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用作 试剂盒 包被 抗原 麻疹病毒 裂解 制备 方法 | ||
1.用作酶联试剂盒包被抗原的麻疹病毒裂解液的制备方法,其特征在于,包括:
S1、采用麻疹病毒减毒株,培养麻疹病毒液;
S2、经过超滤方法分离出所述麻疹病毒的浓缩液;
S3、在所述麻疹病毒的浓缩液中加入麻疹病毒抗原保护液,调整为麻疹病毒原液保存备用;
S4、所述麻疹病毒原液经裂解处理后,加入样品稀释液稀释,得到麻疹病毒裂解液,用作包被抗原生产酶联抗体检测。
2.根据权利要求1中所述的用作酶联试剂盒包被抗原的麻疹病毒裂解液的制备方法,其特征在于,所述麻疹病毒抗原保护液为含磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、柠檬酸三钠、蔗糖、叠氮钠的混合水溶液,其配方为:超纯水1 L、磷酸氢二钠45.72g、磷酸二氢钠40.624g、柠檬酸三钠8.5g、蔗糖10g、叠氮钠1g。
3.根据权利要求1中所述的用作酶联试剂盒包被抗原的麻疹病毒裂解液的制备方法,其特征在于,所述样品稀释液为含磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠和叠氮钠的混合水溶液,其配方为:超纯水1L、磷酸氢二钠5.72g、磷酸二氢钠0.624g、氯化钠8.5g、PEG6000 80g、叠氮钠0.5g。
4.根据权利要求1中所述的用作酶联试剂盒包被抗原的麻疹病毒裂解液的制备方法,其特征在于,所述麻疹病毒浓缩液的分离制备方法为超滤浓缩或蔗糖密度区带离心,采用超滤法将病毒液浓缩,或采用蔗糖密度区带离心法进行纯化,纯化后取样进行蛋白质含量测定。
5.根据权利要求1中所述的进一步的用作酶联试剂盒包被抗原的麻疹病毒裂解液的制备方法,其特征在于,所述S4中,所述麻疹病毒裂解处理过程为,在2000 ug/ml -4000 ug/ml蛋白质含量范围内进行病毒裂解,将纯化后的病毒液中加入终浓度为0.3%、0.5%、0.7%、0.8%的Triton X-100裂解剂,在2℃-8℃条件下进行病毒裂解。
6.根据权利要求5中所述的用作酶联试剂盒包被抗原的麻疹病毒裂解液的制备方法,其特征在于,裂解剂为非离子表面活性剂Triton X-100,所述Triton X-100终浓度为0.3%、0.5%、0.7%、0.8%时,裂解时间分别为1hr、2hr、3hr、4hr,所述麻疹病毒液浓度范围为2000—4000ug/ml。
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