[发明专利]一种包含牦牛骨小分子肽的深度养发素及其制备方法

权利要求书

1.一种包含牦牛骨小分子肽的深度养发素的制备方法，其特征在于：其配方由以下成分组成：表面活性剂15.0-30.0％，牦牛骨小分子肽1.0-15.0％，增稠剂0.01-2.0％，防腐剂0.01-0.5％，保湿剂0.05-2.0％，植物提取物1.0-20.0％，香精0.1-3.0％，其余为去离子水；

所述牦牛骨小分子肽是以牦牛骨胶原蛋白为原料加工而成，其中分子量小于1000道尔顿以下的小肽质量分数为85％左右；

所述表面活性剂为下式（I）所示的季铵盐型表面活性剂：

式（I）

R¹和R²彼此独立地为具有12-26个碳原子以及1或2个双键的脂基；

所述方法包括以下步骤：

(1)称取配方中的去离子水，加热至90-95℃，搅拌条件下加入表面活性剂，搅拌至完全溶解；

(2)再依次加入牦牛骨小分子肽、植物提取物、防腐剂、增稠剂、保湿剂、香精；

(3)搅拌均匀后，用pH调节剂调至洗发水的pH值为6.0-7.0，陈化20小时；

以及，其中所述牦牛骨小分子肽通过以下方法制得：

(1)将剔除表面附着的肉、筋、膜、软骨的牦牛骨晾干，然后粉碎，过30目筛，得 到牦牛骨粉；

(2)按照牦牛骨粉重量加入为其5-10倍重量的脱脂液A，该脱脂液A为氯仿∶甲醇∶ 丙酮＝(2.0-3.0)∶(3.0-6.0)∶(0.5-1.0)体积比的混合物，然后在0-4℃下搅拌脱脂 16-48h，然后过滤掉脱脂液A，将牦牛骨粉加入到含有表面活性剂的乙醇：水混合液即脱脂液B中，脱脂液B中所述表面活性剂的浓度为0.01-0.1mol/L，在5-10 ℃下搅拌脱脂4-10h；

(3)在步骤(2)完成后，过滤掉脱脂液B，然后加入为牦牛骨粉10-15倍重量的0.1mol/L的盐酸溶液，该盐酸溶液含有0.2-0.5mol/L EDTA，在5-10℃搅拌16-32h，除去盐酸溶液，按照每g牦牛骨加入10-15ml的4mol/L盐酸吗啉胍，于5-10℃搅拌8-24h，离心分离，沉淀用Tris-HCl的pH7.4缓冲液和0.5-1.0moL/L乙酸溶液充分洗涤后，用每g牦牛骨加入5-20ml的胃蛋白酶消化液和1-10ml中性蛋白酶消化液的混合液进行混悬，2-4℃下搅拌12-36h，离心分离，收集上清液；

(4)将所述上清液用3.0-5.0mol/LNaOH调节至pH为约7.5，加入NaCl使其浓度为2.0mol/L，4℃盐析过夜，离心得到上清液Q1和沉淀P1；上清液Q1继续加入NaCl调NaCl 浓度至4.0mol/L.4℃盐析过夜，离心得到上清液Q2和沉淀P2；将沉淀P1和P2合并， 然后用0.1-0.3moL/L乙酸溶解，再用1.0-2.0moL/L NaOH中和至pH7.5，再用pH为7.4的0.005moL/LTris-HCl、蒸馏水进行透析平衡后，即得小分子肽初提液E1；

(5)将小分子肽初提液E1和3倍体积的Tris-HCl的pH 7.4的缓冲液混合后，置于烧杯中，加入用该缓冲溶液平衡后的阴离子交换剂，树脂和小分子肽初提 液E1的体积比约为1∶5-1∶10，混合均匀，缓慢搅拌60-120min后，离心分离，收集上清液； 在上清液中加入氯化钠使氯化钠浓度为2.0mol/L，4℃盐析过夜，离心30min，收集沉淀，将该沉淀用0.1-0.3moL/L乙酸溶解，再分别再用0.05mol/L乙酸、0.01mol/L乙酸、蒸馏水 依次进行透析平衡后，得小分子肽溶液，冷冻干燥，得到小分子肽蛋白冻干粉；

步骤（2）中的表面活性剂为下式（II）所示的甜菜碱型两性离子：

式（II）。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：其组成按重量比包括：表面活性剂6.0-20.0％、牦牛骨小分子肽6.0-10.0％、增稠剂0.1-2.0％、防腐剂0.1-0.5％、保湿剂0.5-2.0％、植物提取物4.0-14.0％、香精0.5-3.0％和余量的水。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述增稠剂为羟乙基纤维素、鲸蜡硬脂醇类共聚物中的一种或几种。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述防腐剂为聚季铵盐-10、甲基氯异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮中的一种或几种。