[发明专利]一种microRNA及其小分子抑制剂在抑制肺腺癌干细胞特性中的应用

说明书

技术领域

本发明属于基因治疗药物领域，具体涉及一种microRNA及其小分子抑制剂在抑制肺腺癌干细胞特性中的应用。

背景技术

肺癌是全球最常见的恶性肿瘤，死亡率居恶性肿瘤之首。我国肺癌发病率呈现逐年上升趋势，年平均增长近2％。肺癌根据病理学特点的不同分为多种组织类型，肺癌组织类型不同，其治疗措施也不同。根据2004版WHO分类，常见肺癌组织病理学分型分为非小细胞癌(NSCLC)和小细胞癌(SCLC)。非小细胞癌又分为鳞状细胞癌(SCC)、腺癌(AC)和大细胞癌(LCC)。不同肺癌临床治疗方案不同，预后效果也不同。因此，为了提高治疗效果，肺癌的治疗策略已经从传统的以分期为基础的治疗模式转变为以组织学类型和基因突变为指导的个体化、精准的多学科治疗模式。个体化治疗提高了肺癌的治疗和预后效果。

腺癌作为最常见的肺癌组织学类型，在全球及我国发病率均呈上升趋势。流行病学研究结果显示，非小细胞肺癌的发病有明显的性别差异，尤其是腺癌。腺癌占原发肺癌的50％，是非吸烟患者的主要组织学类型。肿瘤干细胞理论的出现，无疑为肿瘤的防治提供了新思维。该理论认为恶性肿瘤组织中并不是所有肿瘤细胞都具有恶性特征，普通肿瘤细胞经过数次短暂的分化后，即便没有放化疗等外界干预，最终也会走向死亡；仅少量肿瘤干细胞在恶性肿瘤的发生发展过程中起着关键性的作用，肿瘤干细胞具有无限增殖和多潜能分化、自我更新、高度侵袭性和成瘤性、抗凋亡及抗拒化放疗等特点，是肿瘤发生、转移和复发的根源，因此针对肿瘤干细胞的治疗才能从根本上治愈肿瘤。

MicroRNA(miRNA)是一类内生的、长度约为20-24个核苷酸的小RNA，广泛分布于人体各种组织器官，是人类基因组中最大的基因家族之一，其在细胞内具有多种重要的调节作用。药物靶点的研究一直是新药研发中最重要的内容之一，miRNA作为广泛参与基因表达调控的分子，无疑是药物靶点研究的重要对象。例如，针对癌症中的单一蛋白的抗癌药物在临床使用中具有一定局限性，尽管联合治疗可弥补其不足，但这常会涉及药物之间的相互作用所带来的副作用，并导致治疗方案复杂化。与之相比，miRNA具备调控多个靶基因的天然特性，处于多靶点调控网络的中心。总体而言，miRNA调控基因方式是多对多的，一个mRNA可以被多个miRNA调控；一个miRNA分子也可以有多个调控靶点。同一个miRNA可以在一个细胞里同时调控多个靶基因来影响该细胞的生长发育，也可以通过对不同细胞中不同的靶基因的调控使得不同的细胞行使不同的功能，如miR-221，不仅具有调节人血液系统、血管生成、乳腺发育等相关功能，还与肝癌、乳腺癌、甲状腺癌等癌症相关。因此多靶点调控分子miRNA作为药物靶点，在新药研发中越来越受到关注。

以miRNA为靶点寻找和发现特异性抑制剂，逐渐成为miRNA研究的重要部分。目前广泛使用的miRNA抑制剂主要为经过修饰的核苷酸寡聚物，而针对miRNA的化学小分子抑制剂的研究还处在起步阶段。目前，尚未有研究揭露hsa-miR-448与肺腺癌干细胞之间的关系。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种microRNA及其小分子抑制剂在抑制肺腺癌干细胞特性中的应用；本发明第二目的在于提供一种治疗肺腺癌的药物。

上述目的是通过如下技术方案实现的：

一种微小RNAhsa-miR-448作为药物靶标在筛选制备治疗肺腺癌的药物中的应用。

微小RNAhsa-miR-448的抑制剂在制备治疗肺腺癌的药物中的应用。

优选地，所述抑制剂为雪胆素甲。

优选地，所述抑制剂为雪胆素乙。

优选地，所述抑制剂为辛夷脂素。

一种用于治疗肺腺癌的药物，含有上述抑制剂。

本发明的有益效果：

本发明发现hsa-miR-448的表达有助于肺腺癌SPCA-1细胞的增殖，有助于维持肺腺癌SPCA-1干细胞特性；通过靶向下调hsa-miR-448的表达可以有效抑制肺腺癌SPCA-1细胞的增殖，同时降低其干细胞特性。雪胆素甲、雪胆素乙和辛夷脂素为hsa-miR-448的有效抑制剂，体内外均可以有效抑制肺腺癌SPCA-1细胞的增殖。

附图说明

图1为转染后各组细胞相对增殖活力；

图2为转染后各组CD133+细胞的比率及干细胞特性基因OCT4mRNA和蛋白表达水平。

具体实施方式