[发明专利]一株布氏乳杆菌菌株及其青贮饲料发酵剂

说明书

本发明公开了一株布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)菌株，其保藏号为CGMCC No.12850。该菌株具有优秀的抗氧化能力，耐酸，为异型发酵乳酸菌、能够产生大量乙酸，利用此菌株作为青贮饲料发酵剂可以提高饲料营养成分的稳定性，延长发酵后的青贮饲料的有氧稳定性，与其他菌株相比具有明显的优势，可作为青贮饲料发酵剂应用于畜禽养殖中，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于微生物益生菌应用技术领域，涉及一株布氏乳杆菌(Lactobacillusbuchneri)及其青贮饲料发酵剂。

背景技术

布氏乳杆菌作为一种异型发酵的乳酸菌，在青贮发酵过程中能将乳酸分解成乙酸和丙二醇，相对于乳酸而言，乙酸等挥发性脂肪酸是一种更有效的抗真菌的酸类物质，能够提高青贮饲料的有氧稳定性,尽管对有氧稳定性的提高程度不尽相同，但所表现的积极效应是稳定的。

实际利用布氏乳杆菌的过程中，在青贮过程中损失的饲料养分相对较多，这就要通过提高家畜生产性能来弥补异型发酵所产生的潜在的营养损失。因此，寻求一种具有优秀的抗氧化能力的，特别是具有优秀的超氧自由基清除能力的布氏乳杆菌，在提高青贮饲料有氧稳定性的同时，阻止或延缓饲料中某些营养物质氧化，提高饲料利用率，成为青贮添加剂菌种筛选及研发亟待解决的问题。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一株布氏乳杆菌及其青贮饲料发酵剂。

本发明提供了一株布氏乳杆菌，该菌株从发酵成熟的玉米青贮中分离经过初筛复筛得到，在MRS培养基上的菌落形态为乳白色，直径0.1～0.5cm，菌落突起，湿润，边缘生长稀疏，有辐射状，无光泽，不透明。菌体杆状，单个或呈短链排列存在，革兰氏染色阳性菌株，无芽孢。经过糖发酵实验可以初步鉴定为布氏乳杆菌。

利用细菌通用引物对筛选出的菌株进行16s rDNA PCR扩增后鉴定，经NCBI序列比对结果相似性最高(100％)的是布氏乳杆菌，故分子鉴定分离到的菌株为布氏乳杆菌。

将该菌株命名为布氏乳杆菌DBNBS03(Lactobacillus buchneri DBNBS03)，于2016年8月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为：CGMCCNo.12850。

本发明还提供包含该布氏乳杆菌的青贮饲料发酵剂。

在本发明一个实施方案中，所述青贮饲料发酵剂为菌粉，所述菌粉还含有冻干保护剂。

其中，所述的冻干保护剂含有20％的脱脂奶粉、5％的蔗糖、1％的维生素C和1％的谷氨酸钠。

其中，所述布氏乳杆菌的含量为3.5×10¹⁰CFU/g。

本发明还提供所述布氏乳杆菌的发酵方法，其包括如下步骤：按体积比为1％-5％的接种量向发酵培养基中接入培养16-22h的所述布氏乳杆菌的种子液，发酵过程中控制pH7.0-7.5，发酵温度37℃，转速80rpm，通气比1:0.4，罐压0.05MPa。

其中，所述的发酵培养基含有下述重量百分比的组分：蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母膏0.5％，柠檬酸氢二铵0.2％，葡萄糖2％，吐温80 0.1％，乙酸钠0.5％，磷酸氢二钾0.2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％。

本发明的布氏乳杆菌用于青贮饲料发酵剂中，主要用于青贮饲料中添加的发酵剂。

本发明还提供一种青贮发酵方法，将所述的布氏乳杆菌菌粉按30g～50g菌粉/吨青贮原料的比例，用自来水溶解后，均匀喷洒在青贮原料中，真空密封，置于室温阴凉处，发酵30天以上。