[发明专利]一种提高水生植物富磷能力的方法在审
| 申请号： | 201710138564.5 | 申请日： | 2017-03-09 |
| 公开（公告）号： | CN106868040A | 公开（公告）日： | 2017-06-20 |
| 发明（设计）人： | 徐颋;钱伟强;寿鹿;李育才;周琪;张海洋 | 申请（专利权）人： | 浙江绿维环境科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/29;A01H5/00 |
| 代理公司： | 杭州千克知识产权代理有限公司33246 | 代理人： | 裴金华 |
| 地址： | 313000 浙江省湖州市湖州经济技术*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 水生植物 能力 方法 | ||
1.一种提高水生植物富磷能力的方法，其特征在于：通过增加PHR1转录因子的过量表达和剪除PHO2基因，从而提高其富磷能力。
2.根据权利要求1所述的一种提高水生植物富磷能力的方法，其特征在于：所述的增加PHR1转录因子的过量表达，是将转录因子PHR1不包括启动子区域的基因组DNA构建到pCAMBIA1300的双元转基因载体，用于过量表达PHR1。
3.根据权利要求2所述的一种提高水生植物富磷能力的方法，其特征在于：所述的增加PHR1转录因子的过量表达，具体为：进入基因体内改造部分通过Hygomycin(R)、caMV35s、IacZ alpha引导进入PHR1基因段内，由钥匙片段EcoRI(1)、SacI(11)、PstI(44)、HindIII(52)，分别对应打开基因片段TCTAGA、CTGCAG、GTCGAC、AAGCTT，然后由过量片段spuer promoter对PHR1整个系列进行克隆增强表达。
4.根据权利要求1所述的一种提高水生植物富磷能力的方法，其特征在于：所述的敲除PHO2基因，是在植物组织内注入含有crRNA-tracrRNA chimera基因组合段的生物基因液，crRNA-tracrRNA chimera基因组合段中的AtU发出启动信号，sgRNA对植物体内的PHO2进行匹配查找，找到后35S基因片段启动进入细胞核内，由flag进行标签标定，NLS信号找到切断位置开启，然后hSpCas启动，开始溶解切除PHO2基因片段，crRNA-tracrRNA chimera通过连接扣自动取代PHO2原有位置，让敲除PHO2的基因系统继续工作。
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