[发明专利]一种环糊精包合多价特异性猪转移因子制备方法

权利要求书

1.一种环糊精包合多价特异性猪转移因子制备方法，其特征在于，包含以下步骤：

(1)原材料的制备：选健康无病史且予以免疫增强处理的猪宰杀，取脾脏于冰上，冷冻保存；

(2)预处理：称量猪脾后，用冷三蒸水洗净猪脾，剪去其筋膜及脂肪组织，再用冷三蒸水洗涤干净；

(3)破碎：将洗干净的猪脾脏剪碎，加入冷的生理盐水，用高速组织捣碎机破碎，制得匀浆液；

(4)冻融：将匀浆液置于冷冻后再融化，进行若干次交替冻融；

(5)提取：加入冷生理盐水，置于冰冻离心机中进行离心分离，取上层血红色液体，再用漏斗过滤，取滤液；

(6)超滤：将步骤(5)中的滤液用中空纤维管加压超滤，得到滤液；

(7)除菌：将步骤(6)中超滤得到的滤液用滤膜加压过滤除菌，得到猪转移因子；

(8)包合：将羟丙基-β-环糊精和猪转移因子按5:1的比例恒温30℃条件下搅拌2小时进行包合；

(9)分装，冻干，即得包合动物用转移因子粉剂。

2.根据权利要求1所述的一种环糊精包合多价特异性猪转移因子制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，对供脾猪在取脾前予以特异的免疫增强处理，给仔猪免疫一组包含若干类畜禽病原微生物抗原表位的多肽类组合抗原，使制备的转移因子既具有增强非特异性免疫的功能也具有提高特异性抗病原微生物的功能。

3.根据权利要求1所述的一种环糊精包合多价特异性猪转移因子制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中所宰杀猪具体为6月龄猪，冷冻温度为－20℃。

4.根据权利要求1所述的一种环糊精包合多价特异性猪转移因子制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，冷的生理盐水的加入体积为猪脾脏体积的2倍份，高速组织捣碎机破碎工艺具体为采用在冰冻的条件下以1000rpm捣碎3次，每次3min。

5.根据权利要求1所述的一种环糊精包合多价特异性猪转移因子制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中，冷冻温度具体为－80℃，融化方式和温度具体为水浴30℃，交替冻融次数具体为10次。

6.根据权利要求1所述的一种环糊精包合多价特异性猪转移因子制备方法，其特征在于，所述步骤(5)中，加入冷生理盐水的体积具体为物料体积的3倍，冰冻离心机的离心工艺具体为在5℃以4000rpm离心30分钟，过滤漏斗具体为G2砂心漏斗。

7.根据权利要求1所述的一种环糊精包合多价特异性猪转移因子制备方法，其特征在于，所述步骤(6)中，中空纤维管具体为截流值为6000道尔顿的中空纤维管，得到的滤液具体为分子量小于6000道尔顿的转移因子。

8.根据权利要求1所述的一种环糊精包合多价特异性猪转移因子制备方法，其特征在于，所述步骤(7)中，滤膜的孔径具体为0.22μm。