[发明专利]一种从威灵仙中提取苷元的方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物提取技术领域，具体涉及一种从威灵仙中提取苷元的方法及应用。

背景技术

威灵仙为常用中药之一，具有祛风除湿，通络止痛之功效。《中国药典》2015年版收载的威灵仙为毛茛科植物威灵仙Clematis chinensis Osbeck.、棉团铁线莲Clematis hexapetala Pall.或东北铁线莲Clematis manshurica Rupr.的干燥根及根茎。

威灵仙别名有铁脚威灵仙、铁扫帚、风车等，味辛，咸，性温，归膀胱经，作为传统中药，在我国本草著作中记载其具有祛风湿、通经络、止痹痛、消骨鲠等功效，主要用于治疗风湿痹痛，肢体麻木，筋脉拘挛，关节屈伸不利，以及诸骨鲠咽，是中医治疗风湿痹症的最常用中药，而以威灵仙为原料的多个中成药也已相继被成功研发上市，如“颈复康胶囊”等。

威灵仙和东北铁线莲主要含皂苷类成分，而棉团铁线莲主要含黄酮类成分，与前两者差别很大，同时威灵仙和东北铁线莲所含的皂苷也存在差别，根据文献报道及我们前期研究发现，威灵仙及东北铁线莲中含有大量的三萜皂苷，其结构特点为：1.苷元为常春藤皂苷元型及齐顿果酸型；2.大部分具有双糖链，一条糖链以酯键的方式连接在苷元28位；另一条糖链连在苷元的3位；3.3位糖链上常连接异阿魏酰基，对苷元的活性有较大影响。

研究表明，常春藤皂苷元具有降低NO、PGE2、TNF-α、IL-1β以及IL-6等炎症信号因子表达的作用，从而抑制炎症信号传导，达到对炎症反应的抑制及调控作用；而齐墩果酸在临床上常用于治疗传染性急性黄疸型肝炎，具有明显的降低谷丙转氨酶及退黄效果，改善病毒性和慢性迁延性肝炎患者的症状，体征和肝功能；还可用于银屑病、风湿性关节炎、肾炎水肿、肝硬化腹水、急慢性肝炎、胃痛淋浊、血崩、跌打损伤、痈肿、腰膝酸软、胎动不安等症。

通常情况下，齐墩果酸和常春藤皂苷元以糖苷形式存在与多种植物中，这给两者的开发利用带来了不便。

发明内容

针对现有技术中的上述不足，本发明提供一种从威灵仙中提取苷元的方法，目的是提供一种便于提取威灵仙中苷元的方法。

为解决上述的技术问题，本发明采用的技术方案为：

一种从威灵仙中提取苷元的方法，包括以下步骤：

(1)将威灵仙粉碎，过60～80目筛，向粉末中加入70％～95％乙醇，于30～50℃回流提取1～2h，冷却过滤，得总皂苷提取物；其中，威灵仙粉末质量与乙醇体积比为1～3:40～50；

(2)向步骤(1)所得总皂苷提取物中加入浓度为1～5mol/L的盐酸溶液，于60～100℃水解0.5～2.5h，得水解液；其中，酸液与总皂苷提取物体积比为1～5:1～3；

(3)按体积比为1:1的比例向步骤(2)所得水解液中加入石油醚，萃取2～3次，分离石油醚层与水层，再按体积比为1～1.5:1～2的比例向水层中加入乙酸乙酯，萃取2～3次，于60℃以下进行浓缩，制得浓缩产物。

(4)向浓缩产物中加入甲醇溶解，再用制备液相进行分离，流动相为水和甲醇，分段收集流出液，得到苷元。

进一步地，步骤(1)中乙醇质量浓度为70％乙醇。

进一步地，步骤(1)中威灵仙粉末质量与乙醇体积比为1:50。

进一步地，步骤(2)中酸液为盐酸、硫酸、草酸或硼酸。

进一步地，步骤(2)中水解条件为：于100℃、浓度为2mol/L的酸液中，水解1h。

进一步地，步骤(2)中酸液与总皂苷体积比为1.2:1。

进一步地，步骤(3)中乙酸乙酯与水层体积比为1:1。

进一步地，步骤(4)中制备液相分离梯度为：流动相为水和甲醇，柱温为室温，0～30min，60％～90％甲醇、40％～10％水；流速5mL/min。

上述方法制备得到的苷元。

上述苷元在类风湿性关节炎药物制备中的应用。

本发明的有益效果为：

总皂苷提取物经水解后产生大量苷元，便于后续对苷元进行提取分离。

石油醚萃取可除去水解液中的脂类杂质，然后再采用乙酸乙酯对水解液进行萃取，不仅提高了乙酸乙酯的萃取效率，还提升了苷元的提取纯度，有利于提取收集高纯度的苷元。

附图说明

图1为本发明制备得到的总皂苷提取物的液相图谱。

具体实施方式