[发明专利]一种用米曲霉降解β‑胡萝卜素制备烟用香料的方法

权利要求书

1.一种用米曲霉降解β-胡萝卜素制备烟用香料的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)将米曲霉菌株CCTCC：M2016654置于斜面固体培养基中保存备用；

(2)β-胡萝卜素储备液的制备：称取5gβ-胡萝卜素，溶于10mL的二氯甲烷中，待β-胡萝卜素彻底溶解后加入1g Tween-80进行乳化；在避光条件下，将二氯甲烷彻底挥发干，再加入100mL无菌蒸馏水混合均匀，得储备液待用；

(3)降解β-胡萝卜素的产香发酵：

①将保存备用的米曲霉菌株CCTCC：M2016654转接到液体种子培养基中，摇床上28℃培养24h，转速为180r/min，得米曲霉种子液；所述的液体种子培养基：NaNO₃ 2g/L，K₂HPO₄ 1g/L，MgSO₄.7H₂O0.5g/L，KCL 0.5g/L，FeSO₄.7H₂O 0.01g/L，葡萄糖20g/L，pH值6.5～6.8，装入250mL锥形瓶，100mL/瓶，121℃，25min灭菌备用；

②取步骤①所得米曲霉种子液，按培养基体积比1％接入50L发酵罐中进行液体培养，同时按培养基体积比0.1％～2％加入β-胡萝卜素储备液，50L发酵罐定容30L；所述的培养基：NaNO₃ 2g/L，K₂HPO₄ 1g/L，MgSO₄.7H₂O0.5g/L，KCL 0.5g/L，FeSO₄.7H₂O 0.01g/L，葡萄糖20g/L，pH值6.5～6.8；培养控制条件：温度25～40℃，通气比0.1～10，罐压：0.03～0.08MPa，DO≥20％，搅拌速率120～400r/min，发酵时间48h～192h；

(4)发酵完成后过滤除渣，将上清液减压浓缩，即得所需烟用香料。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：为防止香料变质，按烟用香料重量的5％添加丙二醇。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中所述的斜面固体培养基为：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，琼脂20g/L，pH值6.5～6.8，121℃，25min灭菌，冷却至60℃倒平板备用。