[发明专利]一种细胞模型及其构建和筛选五羟色胺受体靶点活性物质之应用在审
| 申请号： | 201710143320.6 | 申请日： | 2017-03-11 |
| 公开（公告）号： | CN108570450A | 公开（公告）日： | 2018-09-25 |
| 发明（设计）人： | 刘剑峰;许婵娟;郑玲玉;马淑敏 | 申请（专利权）人： | 华中科技大学鄂州工业技术研究院 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 华中科技大学专利中心 42201 | 代理人： | 夏惠忠 |
| 地址： | 436044 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞模型 筛选 活性物质 稳定表达 靶点 构建 基因 哺乳动物细胞 五羟色胺受体 靶点活性 表达载体 疾病药物 筛选培养 五羟色胺 应答元件 重组质粒 培养基 低成本 高通量 偏头痛 细胞株 可用 抑郁 应用 激活 携带 | ||
1.一种细胞模型，其特征在于，该细胞模型是携带并能表达核苷酸序列如序列表之序列1所示的5-HT1B基因的哺乳动物细胞。
2.根据权利要求1所述的细胞模型，其特征在于，所述的哺乳动物细胞是CHO细胞或HEK293细胞。
3.根据权利要求1所述的细胞模型，其特征在于，通过表达载体pcDNA5/FRT携带并表达5-HT1B基因。
4.根据权利要求1所述的细胞模型，其特征在于，该细胞模型为于2016年9月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，名称为中国仓鼠卵巢细胞CHO-5-HT1B，保藏编号为CCTCC NO:C2016175的细胞模型。
5.权利要求1或2所述细胞模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将5-HT1B基因与表达载体连接，构建含有5-HT1B基因的重组质粒；
(2)将步骤(1)构建的重组质粒转染哺乳动物细胞，经过药物筛选，培养成能稳定表达5-HT1B基因的细胞株，该细胞株即为所构建的细胞模型。
6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，还包括对细胞株进行综合评估的步骤(3)：在步骤(2)所得细胞株中加入5-HT1B特异性激动剂或抑制剂，测定下游信号应答反应，根据应答反应结果评估该细胞株是否作为细胞模型。
7.根据权利要求3所述的细胞模型的构建方法，其特征在于，步骤(1)中所述的表达载体为pcDNA5/FRT。
8.根据权利要求3所述的细胞模型的构建方法，其特征在于，步骤(2)中所述哺乳动物细胞是CHO细胞或HEK293细胞。
9.权利要求1至4中任一项所述的细胞模型在筛选以五羟色胺受体为靶点的活性物质或在筛选以五羟色胺受体为靶点的药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的以五羟色胺受体为靶点的药物是抗神经性疾病的药物。
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