[发明专利]兽医临床快速增菌与药敏试验培养基及其制备与应用方法

权利要求书

1.一种兽医临床快速增菌与药敏试验培养基，其特征是：增菌培养基的配方为：在每1L增菌培养基原料中含有5g蛋白胨、7-10g䏡胨、5g葡萄糖、5mL甘油、45g营养琼脂、250mL肝汤及Wg去离子水，W=1L增菌培养基的总质量－[蛋白胨、䏡胨、葡萄糖、甘油、琼脂与肝汤加合起来的总质量]；药敏培养基的配方为：在每1L药敏培养基原料中含有16g琼脂、24g MH琼脂、80mL肝汤。

2.一种制备如权利要求1所述的增菌培养基的方法，其特征是：①称取1kg动物肝脏，去筋膜，绞碎，放入烧杯中，加入1L去离子水，边搅拌边加热，煮沸后冷却，依次经洁净纱布、滤纸过滤至洁净容器内，再加入去离子水定容至1L，形成肝汤，直接使用或分装在瓶内，在121℃密闭灭菌20min，将其放置在温度为4℃的环境中进行恒温保存备用；②称取蛋白胨、䏡胨、葡萄糖、甘油、营养琼脂及肝汤，加入去离子水直至去离子水使蛋白胨、䏡胨、葡萄糖、甘油、营养琼脂、肝汤与去离子水加合起来的总体积定容至1L时形成生增菌培养基，混匀后依次煮沸、放凉后形成熟增菌培养基，调节熟增菌培养基pH值至7.2-7.4后对熟增菌培养基进行分装，在115℃密闭灭菌15min，接着将熟增菌培养基分装至无菌培养皿，待其完全凝固后将其放置在温度为4℃的环境中进行恒温保存。

3.一种制备如权利要求1所述的药敏培养基的方法，其特征是：①称取1kg动物肝脏，去筋膜，绞碎，放入烧杯中，加入1L去离子水，边搅拌边加热，煮沸后冷却，依次经洁净纱布、滤纸过滤至洁净容器内，再加入去离子水定容至1L，形成肝汤，直接使用或分装在瓶内，在121℃密闭灭菌20min，将其放置在温度为4℃的环境中进行恒温保存；②称取琼脂、MH琼脂及肝汤，加入去离子水直至去离子使琼脂、MH琼脂、肝汤与去离子水加合起来的总体定容至1L时形成生药敏培养基，混匀后煮沸、放凉后形成熟药敏培养基，调节熟药敏培养基pH值至7.2-7.4后对熟药敏培养基进行分装，在115℃密闭灭菌15min，接着将熟药敏培养基分装至无菌培养皿，待其完全凝固后将其放置在温度为4℃的环境中进行恒温保存。

4.一种应用如权利要求1所述的增菌与药敏培养基的方法，其特征是：①无菌采集病死动物病料：对病死动物进行表面尸体消毒，用消毒过的手术剖解工具打开病死动物腹腔及胸腔，露出内脏器官，用点燃的酒精棉球在内脏器官上进行表面消毒，然后用无菌采样器具剪取小块内脏，重点采集内脏病变部位，快速放入无菌培养皿中；②在增菌培养基上增菌：在无菌超净工作台中，将病料组织断面均匀涂布在增菌培养基表面，翻过来放入37℃恒温培养箱培养15-18 h；③在药敏培养基上药敏试验：在无菌超净工作台中，用接种环挑取增菌培养基上的菌落，均匀涂布在药敏培养基上，贴上成品药敏片或贴上用现有药物自做的药敏片，翻过来放入37℃恒温培养箱培养6-8 h；④根据抑菌圈直径大小判断细菌对抗菌药物的敏感性，从中选出最佳药物。