[发明专利]一种提高双链DNA稳定性的方法有效
申请号: | 201710147666.3 | 申请日: | 2017-03-13 |
公开(公告)号: | CN106834278B | 公开(公告)日: | 2020-09-11 |
发明(设计)人: | 向红先 | 申请(专利权)人: | 上海欧易生物医学科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 马云华 |
地址: | 201114 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 dna 稳定性 方法 | ||
本发明提供一种提高双链DNA稳定性的方法,其包括步骤:将双链DNA保存于稳定剂中,所述稳定剂由如下组分组成:聚乙酰亚胺纳米粒,其粒径为20~200 nm,分子量1800;壳聚糖纳米粒,其粒径为20~200 nm,分子量7~8 KDa,脱乙酰度70~75%;氧化石墨烯;所述稳定剂的溶液为水;其中,聚乙酰亚胺纳米粒、壳聚糖纳米粒和氧化石墨烯的浓度分别为0.02~0.08 mg/ml、0.02~0.08 mg/ml和0.05~0.06μg/ml。本发明可以使得双链DNA在高浓度的内切酶情况下保持高度的稳定性,使得双链DNA可以在更为复杂的环境下保存,利于相关科研工作和产业的发展。
技术领域
本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种提高双链DNA稳定性的方法。
背景技术
双链DNA由于容易在体外受到损坏,而其又是科研活动中非常重要的载体,使得如何避免其受到损坏而保持稳定性成为重要的研究课题。
近几年,利用氧化石墨烯作为双链DNA稳定剂受到了研究者的普遍关注,如《Nanoscale》刊载的“Adsorption of double-stranded DNA to graphene oxidepreventing enzymatic digestion”和《Small》刊载的“Constraint of DNA onFunctionalized Graphene Improves its Biostability and Specificity”均有所报道。
然而,上述方法所能提供的稳定性还是有限的,如在高浓度内切酶的情况下如何保持高度的稳定性,现有的研究成果还没有涉及。
发明内容
针对现有技术的研究空白和缺点,本发明的目的在于提供一种提高双链DNA稳定性的方法,该方法包括步骤:
将双链DNA保存于稳定剂中,所述稳定剂由如下组分组成:
聚乙酰亚胺纳米粒,其粒径为20~200 nm,分子量1800;
壳聚糖纳米粒,其粒径为20~200 nm,分子量7~8 KDa,脱乙酰度70~75%;
氧化石墨烯;
所述稳定剂的溶液为水;
其中,聚乙酰亚胺纳米粒、壳聚糖纳米粒和氧化石墨烯的浓度分别为0.02~0.08mg/ml、0.02~0.08 mg/ml和0.05~0.06μg/ml。
优选的,所述聚乙酰亚胺纳米粒的粒径为150~180 nm。
优选的,所述壳聚糖纳米粒的粒径为150~180 nm。
优选的,所述聚乙酰亚胺纳米粒的浓度为0.03 mg/ml。
优选的,所述壳聚糖纳米粒的浓度为0.03 mg/ml。
优选的,所述氧化石墨烯的浓度为0.055μg/ml。
本发明的有益效果:
本发明可以使得双链DNA在高浓度的内切酶情况下保持高度的稳定性,使得双链DNA可以在更为复杂的环境下保存,利于相关科研工作和产业的发展。
附图说明
图1为本发明琼脂糖凝胶电泳结果图,泳道1为实施例1稳定剂对DNA保护结果,泳道2为实施例2稳定剂对DNA保护结果,泳道3为实施例3稳定剂对DNA保护结果,泳道4为对比实施例1稳定剂对DNA保护结果,泳道5为对比实施例2稳定剂对DNA保护结果,泳道6为对比实施例3稳定剂对DNA保护结果。
具体实施方式
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