[发明专利]一种烟草叶片还原糖的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于烟叶还原糖检测技术领域，尤其涉及一种还原糖含量测定方法。

背景技术

烟草在中国经济社会发展中占有极为重要的地位，还原糖含量是鉴定烤烟品质的重要指标之一，烟叶还原糖含量是烟叶检测技术中必检测的指标。

烤烟叶片还原糖的经典测定方法是铜还原一滴定法，如芒森·沃克法、伯川法，一般实验室所用的比较快捷的方法为比色分析法，如斐林试剂比色法、 磷钼酸比色法、邻甲苯胺比色法、硫酸一蒽酮法等。斐林试剂比色法和3，5一二硝基水杨酸比色法 (DNS) 是目前最常用的方法，但二者均存在一些不足，前者提取方法简单而测定过程繁琐；后者测定方法简单但提取耗时较长、检测结果不稳定。

发明内容

本发明的目的正是针对上述现有技术中所存在的不足之处而提供一种检测结果准确、重复性好的烟叶还原糖含量检测的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

本发明的烟草叶片还原糖的检测方法利用烟叶中的还原糖，再添加苦味酸和碳酸钠在沸水条件下反应后，通过检测反应后产物在285 nm的吸光值，通过还原糖的标准曲线，来计算烟叶还原糖的含量，具体步骤如下：

a、烟叶还原糖提取：

称取100 mg烟叶，加入沸水8~12 mL，微沸4~6 min，充分振荡后经滤纸过滤，得到还原糖提取液，用于检测。

b、与苦味酸及碳酸钠反应：

取待测提取液0.5 mL，依次加入浓度为0.5%的苦味酸0.3 mL、浓度为20%碳酸钠1.5 mL，将其置于沸水中加热10 min，之后置于冷水中冷却2 min。

c、检测：

利用285 nm的波长检测反应液的吸光值。

d、与标准曲线数据对比确定还原糖含量:

把检测到的吸光值，与相关数据进行对比，以确定还原糖含量。

本发明的有益效果如下：

（1）烟叶还原糖含量检测准确：还原糖含量与苦味酸和碳酸钠反应后的物质浓度一致，且在285 nm有强的吸光值，该吸光值能够准确反应烟叶中还原糖的含量。

（2）烟叶还原糖含量检测重复性好：还原糖与苦味酸和碳酸钠的反应在沸水条件下比较稳定，受外界的影响较小，该检测方法的重复性好。

具体实施方式

本发明以下将结合实施例作进一步描述：

本发明的步骤如下：

a、烟叶还原糖提取：

称取100 mg烟叶，放入20 mL离心管中，加入沸水10 mL，微沸5 min，加水至15 mL，充分振荡后经滤纸过滤，得到还原糖提取液，用于检测。

b、与苦味酸及碳酸钠反应：

取待测提取液0.5 mL，依次加入浓度为0.5%的苦味酸0.3 mL、浓度为20%碳酸钠1.5 mL，将其置于沸水中加热10 min，再在冷水上冷却2 min。

c、检测：

利用285 nm的波长检测反应液的吸光值。

d、与标准曲线数据对比确定还原糖含量:

把检测到的吸光值，与相关数据进行对比，以确定还原糖含量。