[发明专利]一种从镰形棘豆中分离制备5种具有抗炎活性化合物的方法

说明书

本发明公开了一种从镰形棘豆中分离制备5种具有抗炎活性化合物的方法，所述5种化合物为乔松素、4‑羟基‑2甲氧基查耳酮、7‑羟基二氢黄酮、2,4‑二羟基‑二氢查尔酮和2,4‑二羟基‑查尔酮，包括以下步骤：(1)取镰形棘豆总黄酮提取物，依次用石油醚和乙酸乙酯提取，取乙酸乙酯部位；(2)取乙酸乙酯部位干燥粉末，树脂纯化，甲醇洗脱，取洗脱物，干燥，得纯化物；(3)将纯化物用制备色谱分离，得到高纯度的乔松素、4‑羟基‑2甲氧基查耳酮、7‑羟基二氢黄酮、2,4‑二羟基‑二氢查尔酮和2,4‑二羟基‑查尔酮。该方法制备量大，产品纯度高，适合于工业应用。

技术领域

本发明涉及一种从镰形棘豆中分离制备5种具有抗炎活性化合物的方法。

背景技术

藏药镰形棘豆(Oxytropis falcate Bunge)(藏药名为莪达夏)是豆科(Leguminosae)棘豆属(Oxytropis D.C.)多年生草本植物。生长在2700～4300m的河滩、沙地、山坡、草甸，主要产于青藏高原。据《晶珠本草》记载，镰形棘豆具有愈合疮口、利便、防止骨刺产生、治病痛、除毒、止血之功效，并能清毒、治疗炭疽病、麻风病及流感、扁桃体炎。

临床研究证明，镰形棘豆对于预防、治疗流行性感冒及慢性气管炎有独特疗效。众所周知，由于植物中化合物种类众多且含量不一，从植物中直接大量获得有实用价值的高纯度化合物是极为困难的，尤其当需要从中同时提取出多个目标化合物时，则更为艰难。因此目前，尽管已知镰形棘豆中包含多种化合物，却并没有以其为原料，同时得到多种高纯度活性化合物的报道。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种从镰形棘豆中分离制备5种具有抗炎活性化合物的方法，所述5种具有抗炎活性的化合物为乔松素、4-羟基-2甲氧基查耳酮、7-羟基二氢黄酮、2,4-二羟基-二氢查尔酮和2,4-二羟基-查尔酮，包括以下步骤：

(1)取镰形棘豆总黄酮提取物，依次用石油醚和乙酸乙酯提取，取乙酸乙酯部位；

(2)取乙酸乙酯部位干燥粉末，树脂纯化，甲醇洗脱，取洗脱物，干燥，得纯化物；

(3)将纯化物用制备色谱分离，得到高纯度的乔松素、4-羟基-2甲氧基查耳酮、7-羟基二氢黄酮、2,4-二羟基-二氢查尔酮和2,4-二羟基-查尔酮；色谱条件如下：

检测波长：210～380nm；

色谱柱：C18或C8色谱柱；

流动相A为甲醇，流动相B为水；

梯度洗脱条件为：0～10min，50％A→60％A；10～40min，60％A→90％A。

进一步地，所述色谱柱为C18色谱柱。

进一步地，所述色谱条件的柱温为20～30℃。

进一步地，所述树脂为微孔树脂或是大孔树脂

进一步地，所述色谱条件的流速为10～100mL/min。

进一步地，所述检测波长为360nm。

进一步地，所述镰形棘豆总黄酮提取物是通过下述方法制备得到的：

(1)取镰形棘豆，加入浓度为70％-80％醇类溶剂，微波提取得提取液，所述醇类溶剂与药材的体积质量比为10～35:1mL/g；

(2)浓缩提取液，陶瓷膜滤过，有机膜纯化，取滤液，干燥即得。

进一步地，所述醇类溶剂为浓度75％的乙醇，微波提取的功率为731W，提取时间为26分钟，乙醇与药材的体积质量比为26:1。

进一步地，所述甲醇洗脱为用2～10倍柱体积的80％甲醇溶液洗脱。