[发明专利]CYP2D6基因检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种CYP2D6基因检测试剂盒，包括用于对含rs1801253位点的核酸片段进行特异性扩增的引物组，其特征在于，所述引物组包括上游引物SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ IDNO:3或SEQ ID NO:4，以及下游引物SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8。

2.根据权利要求1所述的基因检测试剂盒，其特征在于，所述基因检测试剂盒还包括接头，所述接头包括接头A、接头B、接头C、接头D中的至少一种；所述接头A由SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10组成；所述接头B由SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12组成；所述接头C由SEQ IDNO:13和SEQ ID NO:14组成；所述接头D由SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16组成。

3.根据权利要求1所述的基因检测试剂盒，其特征在于，所述基因检测试剂盒还包括测序引物SEQ ID NO:17，所述测序引物用于对含rs1801253位点的文库分子进行测序。

4.根据权利要求3所述的基因检测试剂盒，其特征在于，所述测序引物的5’末端经过磷酸化修饰。

5.一种基因检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

A、利用扩增引物组，对含rs1801253位点的样本进行扩增，得扩增产物；其特征在于，所述引物组包括上游引物SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4，以及下游引物SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8；

B、在所述扩增产物上连接接头，得到文库分子；

C、采用第二代高通量基因测序技术对所述文库分子进行测序，确定rs1801253位点的基因型。

6.根据权利要求5所述的基因检测方法，其特征在于，所述步骤A包括以下步骤：

A1、采用第一引物组扩增CYP2D6基因10号等位基因区域，得第一扩增产物；所述第一引物组包括第一上游引物SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2，以及第一下游引物SEQ ID NO:5或SEQID NO:6；；

A2、以第一扩增产物为模板，采用第二引物组扩增含rs1801253位点的核酸片段，得第二扩增产物；所述第二引物组包括第二上游引物SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4，以及第二下游引物SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8。

7.根据权利要求6所述的基因检测方法，其特征在于，所述步骤B中还包括向第二扩增产物中加入USER酶进行切割的步骤，所述第二扩增产物经USER酶切割形成第一粘性末端。

8.根据权利要求5所述的基因检测方法，其特征在于，所述接头包括接头A、接头B、接头C、接头D中的至少一种；所述接头A由SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10组成；所述接头B由SEQID NO:11和SEQ ID NO:12组成；所述接头C由SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14组成；所述接头D由SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16组成。

9.根据权利要求5所述的基因检测方法，其特征在于，步骤C中用于对含rs1801253位点的文库分子进行测序的测序引物为SEQ ID NO:17。

10.根据权利要求9所述的基因检测方法，其特征在于，所述测序引物的5’末端经过磷酸化修饰。