[发明专利]两色金鸡菊提取物在制备治疗血栓形成性疾病药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及两色金鸡菊提取物在制备治疗血栓形成性疾病药物中的应用。

背景技术

金鸡菊（Coreopsis tinctoria Nuff.）又名雪菊，系菊科（compositae）金鸡菊属（Coreopsis）的干燥头状花序，单瓣、重瓣或半重瓣，舌状花黄色或金黄色，花期6～9月。大花金鸡菊属于北温带植物，原产于北美，弗罗里达州及墨西哥州，我国1936年作为观赏植物引种子至庐山、南岳等地栽培，目前各地除供观赏外，还用全草入药，而且从花中提取的食用色素，具有清热解毒和降压之功效。新疆金鸡菊广泛分布于和田地区海拔高3000米左右的昆仑山区，有较丰富的野生资源，在民间经常将其干花用来泡茶。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供了一种两色金鸡菊提取物在制备治疗血栓形成性疾病药物中的应用。

为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：

两色金鸡菊提取物在制备治疗血栓形成性疾病药物中的应用，所述两色金鸡菊提取物为两色金鸡菊的乙醇提取物。所述治疗血栓形成性疾病药物为抗凝血药物。所述两色金鸡菊提取物可通过抑制血栓素B2（TXB₂）生成、促进6酮-前列腺素F1α（6-Keto-PG）生成、抑制二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板聚集达到抗凝血功能。

优选地，所述的乙醇提取物通过包括如下步骤的方法得到：两色金鸡菊先用浓度为50～80vt%的乙醇溶液浸渍5～15h，再于50～80℃回流提取，提取液浓缩、干燥。

优选地，回流提取的料液比为1:10～20。

两色金鸡菊提取物在制备治疗血栓形成性疾病药物中的应用，所述治疗血栓形成性疾病药物为抗凝血药物，通过抑制血栓素B2生成、促进6酮-前列腺素F1α生成、抑制由二磷酸腺苷诱导的血小板聚集、抑制由胶原蛋白（COL）诱导的血小板聚集达到抗凝血功能，所述两色金鸡菊提取物通过如下方法得到：

（1）两色金鸡菊的乙醇提取物过大孔树脂柱，依次用水、乙醇溶液洗脱，收到乙醇洗脱液；

（2）步骤（1）的乙醇洗脱液过聚酰胺柱，用乙醇溶液洗脱，得到的洗脱液浓缩、干燥。

优选地，步骤（1）洗脱所用的乙醇溶液浓度为50～80vt%，步骤（2）洗脱所用的乙醇溶液浓度为10～70vt%。

本文中，以ETE表示两色金鸡菊的乙醇提取物，以ETEP表示ETE进一步经过上述大孔树脂和聚酰胺处理后得到的部位。

药效学实验

两色金鸡菊乙醇提取物（ETE）对大鼠急性血栓模型的影响

材料与仪器

分组及给药

将72只Sprague Dawley大鼠按体重随机分成6组，每组12只雌雄各半，即空白组、急性血栓模型组、阿司匹林组（拜阿司匹林10mg/kg）、高剂量组（ETE1.2g/kg）、中剂量组（ETE0.6g/kg）、低剂量组（ETE0.3g/kg），灌胃给药，空白组和模型组大鼠灌胃给予等体积的空白溶剂。给药21天，每天一次，灌胃量10ml/kg。

急性血栓模型的建立

末次给药1h后，腹腔注射4%戊巴比妥钠（40mg/kg）麻醉，分离左侧颈总动脉。将吸有20%三氯化铁的1cm×1cm的滤包裹分离出的颈总动脉，计时20min后取下。空白组用生理盐水浸泡滤纸，结扎纸小片两侧血管取下血栓称重并做病理切片；腹主动脉取血，EDTA抗凝血测定血浆TXB₂及血浆6-Keto-PG；3.8%枸橼酸钠抗凝血（枸橼酸钠：全血为1:9，v/v）用于APTT、PT、TT和FIB含量的测定。

统计学方法

采用SPSS17.0软件包对数据进行处理。结果以表示，数据先进行正态性检验，符合正态分布组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，p＜0.05为具有统计学意义。

实验结果

凝血四项及平均栓重结果

凝血四项及平均栓重结果见表1。

表1 各组凝血四项及平均栓重的结果（n=12）

注：*与空白组比较P＜0.05，**与空白组比较P＜0.01

#与模型组比较P＜0.05，##与模型组比较P＜0.01