[发明专利]防治核桃树腐烂病的生物农药及其制备方法和应用

权利要求书

1.防治核桃树腐烂病的生物农药，其特征在于，按重量百分比计由以下组分组成：乳酸菌发酵液200-300倍稀释液5％-10％、枯草芽孢杆菌发酵液200-300倍稀释液10％-25％，细黄连霉菌发酵液200-300倍稀释液10％-25％，苦参、花椒和马鞭草混合物提取物3％-5％，余量为水。

2.根据权利要求1所述防治核桃树腐烂病的生物农药，其特征在于，按重量百分比计由以下组分组成：乳酸菌发酵液200-300倍稀释液6％-8％、枯草芽孢杆菌发酵液200-300倍稀释液15％-23％，细黄连霉菌发酵液200-300倍稀释液12％-20％，苦参、花椒和马鞭草混合物提取物3.5％-4.5％，余量为水。

3.根据权利要求1所述防治核桃树腐烂病的生物农药，其特征在于，按重量百分比计由以下组分组成：乳酸菌发酵液200-300倍稀释液7％、枯草芽孢杆菌发酵液200-300倍稀释液18％，细黄连霉菌发酵液200-300倍稀释液15％，苦参、花椒和马鞭草混合物提取物4％，余量为水。

4.根据权利要求1～3任一项所述防治核桃树腐烂病的生物农药，其特征在于：所述乳酸菌发酵液由以下方法制备：将乳酸菌划线培养后挑取单菌落接种于液体培养基内，然后在25-35℃下在摇床中培养20-30小时获得种子液，然后将种子液按重量比为l:8-20接种于液体培养基内，再在25-35℃下在摇床中60-80小时得乳酸菌发酵液；

所述枯草芽孢杆菌发酵液由以下方法制备：将枯草芽孢杆菌发酵液划线培养后挑取单菌落于液体培养基内，在25-35℃下在摇床中培养20-30小时获得种子液，然后将种子液按重量比为l:8-20接种于液体培养基内，再在25-35℃下在摇床中60-80小时得枯草芽孢杆菌发酵液；

所述细黄连霉菌发酵液由以下方法制备：将细黄连霉菌划线培养后挑取单菌落于液体培养基内，在25-35℃下在摇床中培养30-80小时获得种子液，然后将种子液按重量比为l:8-20接种于液体培养基内，再在25-35℃下在摇床中60-80小时得细黄连霉菌发酵液；

所述苦参、花椒和马鞭草混合物提取物由以下方法制备：按重量比为1～2:1～2:1～2分别取花椒、马鞭草和苦参干品混合，加入相当于混合物重量3～5倍的水浸泡1～3小时，然后90～100℃保持10～30分钟，冷却，过滤弃残渣，收集滤液即可。

5.根据权利要求4所述防治核桃树腐烂病的生物农药，其特征在于：所述液体培养基由以下方法制备：按重量份取淀粉10-30份，牛肉膏10-30份，蛋白胨10-30份，NaCl 4-8份，水1000-3000份；充分溶解后加入NaOH调pH至7-7.5，过滤，经湿热灭菌，冷却至18～35℃即得液体培养基。

6.权利要求1～5任一项所述防治核桃树腐烂病的生物农药的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

a、按配方取乳酸菌发酵液的200-300倍稀释液，然后加入配方量的枯草芽孢杆菌发酵液200-300倍稀释液和细黄连霉菌发酵液200-300倍稀释液，获得发酵液混合物，记为培养液A；

b、按重量比分别取花椒、马鞭草和苦参干品，加入相当于混合物重量3～5倍的水浸泡1～3小时，然后90～100℃保持10～30分钟，冷却，过滤弃残渣，收集滤液获得苦参、花椒和马鞭草混合物提取物；

c、将培养液A与苦参、花椒和马鞭草混合物提取物混合搅拌均匀后，于30℃-50℃放置48h以上即得防治核桃树腐烂病的生物农药。