[发明专利]DNA包被液及其制备方法和DNA包被方法有效
申请号: | 201710161745.X | 申请日: | 2017-03-17 |
公开(公告)号: | CN106932595B | 公开(公告)日: | 2019-04-02 |
发明(设计)人: | 张鹭鹭;李先坤;张爱国 | 申请(专利权)人: | 郑州科蒂亚生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/544;G01N33/531 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 赵青朵 |
地址: | 450001 河南省郑州市高*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | dna 包被 及其 制备 方法 | ||
1.一种DNA杂交方法,其特征在于,包括如下步骤:将引物5’-CACTTCACTTTCTTTCCAAGAG-3’与DNA包被液混合均匀,所述DNA包被液由硫酸铵、氯化钠和水组成;以质量百分比计,各组分用量为:硫酸铵42.0%~43.0%,氯化钠0.5%~0.8%,水补足;所述DNA包被液的pH值为6.0~6.2,混合液以每孔100μL加入到微孔板中,室温放置20h,弃掉孔内液体,干燥微孔板,然后进行杂交试验,首先加入预放大分子,55℃孵育40分钟;再加入放大分子,55℃孵育40分钟;然后加入探针标记物,50℃孵育40分钟,最后加入底物,46℃孵育20min,用冷光仪测定其化学发光信号的光子数。
2.根据权利要求1所述的DNA杂交方法,其特征在于,所述干燥为在10%湿度条件下干燥3h。
3.根据权利要求1所述的DNA杂交方法,其特征在于,所述用于定量检测的DNA包被液制备方法为将硫酸铵、氯化钠溶解于水中,调节pH值至6.0~6.2,过滤除菌。
4.根据权利要求3所述的DNA杂交方法,其特征在于,调节pH值采用的试剂为硫酸或氨水。
5.根据权利要求1所述的DNA杂交方法,其特征在于,所采用的DNA的包被方法采用DNA包被液作为缓冲液,将DNA样品与固相载体进行孵育。
6.根据权利要求5所述的DNA杂交方法,其特征在于,所述固相载体为聚苯乙烯固相载体。
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