[发明专利]一种从魔芋中高效提取神经酰胺的方法

权利要求书

1.一种从魔芋中高效提取神经酰胺的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)粗提取：以魔芋生产中产生的副产品为原料，除去杂质，按照料液质量体积比为1:4.5～5g/ml的比例加入体积分数为75％～80％的乙醇溶液在50～60℃条件下超声提取25～45min，然后趁热过滤，收集滤液；再次向滤渣中加入体积分数为80％～90％的乙醇溶液，在50～60℃条件下超声提取25～45min，滤渣与所加入的乙醇溶液的质量体积比为1:3.5～4.5g/ml，趁热过滤并收集滤液；向二次过滤的滤渣中加入体积分数为90％～95％的乙醇溶液，在50～60℃条件下超声提取15～20min，滤渣与所加入的乙醇溶液的质量体积比为1:3～3.5g/ml，趁热过滤，将所收集的滤液合并；

2)除去异味：通过蒸馏回收滤液中的乙醇，得到神经酰胺粗提物浓缩液；向浓缩液中加入质量分数为1％～1.4％的柠檬酸溶液，在30～40℃条件下搅拌1～3h，浓缩液与所加入柠檬酸溶液的体积比为1：3～4，保持搅拌转速80～100r/min；静置10～15min后收集油相，水相用石油醚萃取2～3次，然后将油相与石油醚萃取液合并，浓缩合并后的液体并回收溶剂；

3)萃取纯化：先后用石油醚与乙酸乙酯体积比为19:1、15:1和9:1的溶剂对上一步得到浓缩液进行萃取，合并萃取液，将萃取液浓缩至粘稠并回收溶剂；

4)层析纯化：将硅胶采用湿法装柱，并用洗脱剂平衡层析柱，将上一步所得浓缩物用洗脱剂溶解，湿法上样；所述洗脱剂先后采用石油醚-乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇进行梯度洗脱，先采用石油醚与乙酸乙酯的体积比梯度变化顺序为19:1、15:5、3:2、1:4的溶剂洗脱，然后采用乙酸乙酯与甲醇的体积比为9:1、5:1、2:1、1:1的溶剂继续洗脱；收集并合并含有相同成分的流出液；

5)干燥：回收浓缩液中的溶剂，真空冷冻干燥得到神经酰胺样品。

2.根据权利要求1所述的从魔芋中高效提取神经酰胺的方法，其特征在于：所述的步骤1)中超声提取是在500W下进行的。

3.根据权利要求1所述的从魔芋中高效提取神经酰胺的方法，其特征在于：所述的步骤2)中回收的乙醇溶剂，经测定密度并与体积分数为75％～95％的乙醇进行比较，计算并调整乙醇含量，作为粗提取溶剂重复利用。

4.根据权利要求1所述的从魔芋中高效提取神经酰胺的方法，其特征在于：所述的步骤2)中加入柠檬酸的质量分数为1.2％，柠檬酸与浓缩液按体积比1:3.5在30～40℃、90r/min的条件下搅拌2h。

5.根据权利要求1所述的从魔芋中高效提取神经酰胺的方法，其特征在于：所述的步骤3)中回收的石油醚与乙酸乙酯混合溶剂，根据石油醚与乙酸乙酯体积比为19:1或15:1或9:1的溶剂密度进行计算和调整，使混合溶剂的比例为石油醚与乙酸乙酯体积比为19:1或15:1或9:1，作为萃取溶剂重复利用。

6.根据权利要求1所述的从魔芋中高效提取神经酰胺的方法，其特征在于：所述的步骤4)中石油醚与乙酸乙酯体积比为19:1和1:4的洗脱剂用量为2BV，体积比为15:5和3:2的洗脱剂用量为3BV；乙酸乙酯与甲醇的体积比为9:1和1:1的洗脱剂用量为1BV，体积比为5:1和2:1的洗脱剂用量为2BV。