[发明专利]一种鄂西红豆离体胚快速发芽的处理方法

说明书

本发明涉及一种鄂西红豆离体胚快速发芽的处理方法，本发明提供一种鄂西红豆离体胚快速发芽的关键技术，属于红豆属种子资源保存和快繁技术，摆脱现有鄂西红豆种子发芽率低和生长速度慢的困境，大大缩短鄂西红豆组培周期，本发明选取籽粒饱满的种子为材料，将切开5mm小口的种子置于40℃恒温水浴，浸泡2h，然后用无菌手术刀将种子切成小块，置于培养基MS+6‑BA 0.5mg·L^‑1+NAA 0.2mg·L^‑1，培养10‑14d，胚的发芽率达98％以上，苗高达4.0‑6.5cm。

技术领域

本发明属农业技术领域，具体涉及一种鄂西红豆离体胚快速发芽的处理方法。

背景技术

目前，鄂西红豆种子豆荚的采摘时期大都是11月下旬，这时收集的红豆种子，皮色变成深红色，皮层也由薄变为厚厚的角质膜，很难透水，因此不经处理的鄂西红豆种子场圃发芽率极低(10％以下)。目前，提高发芽率的方法不外乎两种，第一种处理方法是温水浸种，由于种皮太厚，种子很难吸水膨胀，要每天换水1～2次、浸泡7～10天，这种方法处理的种子发芽率低(20.3～80.5％)，而且出苗极不整齐，甚至有的种子在第二年发芽，给小苗的田间管理造成了很大的麻烦；第二种处理方法是机械锉伤种皮，这种方法发芽率高(85％左右)、出苗也整齐，但是这种方法不仅费事、费力，而且稍有不慎会伤及种子的子叶和胚芽，种子破损的部位很容易遭受病菌的感染而霉烂(遇到下雨天种子会全军覆没)，直接影响种子的发芽率及出苗质量。

发明内容

为了解决上述存在的技术问题，本发明提供了一种鄂西红豆离体胚快速发芽的处理方法，具体的技术方案为：

一种鄂西红豆种子离体胚快速发芽方法，其特征包括如下步骤：

(1)2015年10月于江西广昌采摘籽粒结实、饱满的野生鄂西红豆树种子；

(2)将收集的种子置于1000ml烧杯，用洗洁精搓洗种子表皮，自来水冲洗10min，滤干；

(3)用消毒后的枝剪在胚生长点远端处剪开一小口；

(4)将上述(3)处理的种子放置盛有200ml无菌水的500ml烧杯中，烧杯置于恒温水浴锅；

(5)用无菌手术刀将上述(4)处理后的种子切成含生长点的小块，去除种皮；

(6)将上述(5)所得小块经75％酒精消毒30sec，无菌水清洗4次，然后再经0.1％升汞消毒12min，无菌水清洗4次，无菌滤纸吸干；

(7)将上述(6)小块生长点朝上置于培养基MS+6-BA 0.2～1.5mg·L^-1+NAA0.05～0.3mg·L^-1+琼脂8g·L^-1+蔗糖30g·L^-1+活性炭2mg·L^-1，25℃，光照强度1500～2000lx，培养时间10～14d；

步骤(3)中，所述的小口口径为3-8mm；更优选的为所述的口径为5mm。

步骤(4)中，所述的水浴温度为35-55℃，水浴时间2-5h；更优选的为所述的水浴温度为40℃，水浴时间3h。

步骤(5)中，所述的切法为：在距生长点远端1/3～3/5处先横切一刀；之后在距生长点近端左右2～8mm处各纵切一刀；更优选的为所述的在距生长点远端2/5处横切一刀；在距生长点近端左右5mm处各纵切一刀。步骤(7)中，所述的小块插入培养基的深度为2～8mm；更优选的为所述的深度为3mm，培养基中的植物激素浓度为6-BA 0.5mg·L^-1+NAA 0.2mg·L^-1。

本发明与现有技术相比所取得的技术效果为：采用本发明处理的鄂西红豆种子，摆脱现有鄂西红豆种子发芽率低和生长速度慢的困境，大大缩短鄂西红豆组培周期，简单、快捷，在生产中较易推广。