[发明专利]一种包埋功能化纳米纤维膜的微流控芯片及其应用

权利要求书

1.一种包埋功能化纳米纤维膜的微流控芯片，包括玻璃底板、样品注入口、细胞捕获通道和储液池，其特征在于：所述功能化纳米纤维膜位于细胞捕获通道和玻璃底板之间；其中，功能化纳米纤维膜为表面修饰有链霉亲和素SA的纳米纤维膜。

2.根据权利要求1所述的一种包埋功能化纳米纤维膜的微流控芯片，其特征在于：所述细胞捕获通道内具有250-300个椭圆柱阵列。

3.根据权利要求1所述的一种包埋功能化纳米纤维膜的微流控芯片，其特征在于：所述纳米纤维膜为采用静电纺丝技术制备的PLGA纳米纤维膜。

4.一种如权利要求1所述的包埋功能化纳米纤维膜的微流控芯片的应用，其特征在于：所述微流控芯片用于去除白细胞及阴性分选循环肿瘤细胞。

5.根据权利要求4所述的一种包埋功能化纳米纤维膜的微流控芯片的应用，其特征在于：具体步骤如下：

(1)以表面修饰有SA的PLGA纳米纤维膜为基底，通过等离子处理将玻璃基底、PLGA纳米纤维膜与微流控通道键合，得到微流控芯片；

(2)将半胱氨酸溶液通入微流控芯片，再通入磷酸盐缓冲液，得到表面钝化处理后的微流控芯片；

(3)取血液样品，利用红细胞裂解液去除血液中的红细胞，得到白细胞悬浮液，随后用4,6-联脒-2-苯基吲哚DAPI对得到的白细胞进行染色，并用血球计数板对白细胞进行计数；再利用生物素化的白细胞抗体anti-CD45通过抗原-抗体结合对白细胞进行生物素标记，得到生物素标记的白细胞悬浮液；最后将白细胞悬浮液通入步骤(2)得到的微流控芯片，即可。

6.根据权利要求5所述的一种包埋功能化纳米纤维膜的微流控芯片的应用，其特征在于：所述步骤(1)中的修饰SA的方法为：将PLGA纳米纤维膜放入到加有超纯水的染色缸中，利用二氯乙烷EDC和N-羟基硫代琥珀酰亚胺NHS活化纳米纤维膜表面的羧基；逐滴加入浓度为1.25-1.5mg/mL的链霉亲和素溶液，磁力搅拌下反应2-3天，然后用超纯水对反应后的纳米纤维膜清洗，自然晾干，得到链霉亲和素功能化的PLGA纳米纤维膜。

7.根据权利要求5所述的一种包埋功能化纳米纤维膜的微流控芯片的应用，其特征在于：所述步骤(2)中的半胱氨酸溶液的浓度为5mg/mL，通入时间为30min。

8.根据权利要求5所述的一种包埋功能化纳米纤维膜的微流控芯片的应用，其特征在于：所述步骤(3)中的生物素化的白细胞抗体anti-CD45浓度为50μg/mL，与血液样品的体积比为1:50。