[发明专利]一种单唾液酸四己糖神经节苷脂钠的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物制备方法领域，具体是指一种单唾液酸四己糖神经节苷脂钠的制备方法。

背景技术

单唾液酸四己糖神经节苷脂钠，系自猪脑中提取制得的对神经细胞功能损伤具有作用的物质。现有技术对于单唾液酸四己糖神经节苷脂钠的提取都立足于提高产品纯度、收率，降低产品成本，减少毒害有机溶剂( 特别是氯仿) 的使用量等方面进行了大量的研究，并且市场已有单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液、注射用单唾液酸四己糖神经节苷脂钠等多种产品在销售使用。然而，由于来源于生物原料猪脑，单唾液酸四己糖神经节苷脂钠的不良反应比较多，特别是与药物中的杂质、污染物、添加剂、病毒或特殊代谢产物形成有关的过敏反应，而且目前的提取技术也不够精细，提取的单唾液酸四己糖神经节苷脂钠中还会含有微量的有害物质和杂质。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提取纯度高、杂质少、步骤简单、安全性高的单唾液酸四己糖神经节苷脂钠的制备方法。

本发明通过下述技术方案实现：一种单唾液酸四己糖神经节苷脂钠的制备方法，包括以下步骤:

（1）以鲜猪脑为原料进行搅拌，得到鲜猪脑的浓缩液；

（2）对制备的浓缩液进行树脂层析，并抽滤干燥得到浓缩粉：

（3）硅胶粗纯化步骤：将浓缩粉溶于由甲醇、三氯和纯水制备的流动相，然后进行硅胶层析，沉淀干燥得到粗品浓缩粉；

（4）硅胶精纯化步骤：将粗品浓缩粉溶于由甲醇、三氯和纯水制备的层析缓冲液中，然后进行硅胶层析，沉淀干燥得到精品浓缩粉。

进一步地，所述步骤（1）包括：猪脑的解冻、分拣杂质、搅拌、压滤、分层、分解，得到鲜猪脑浓缩液。

进一步地，步骤（2）包括：新树脂的制备以及树脂强化再生、树脂的吸附清洗以及甲醇脱洗、树脂及鲜猪脑浓缩液的浓缩、丙酮沉淀、抽滤干燥，得到浓缩粉。

进一步地，新树脂的制备以及树脂强化再生的具体步骤为：

（2.1）新树脂用饮用水清洗2BV；树脂强化再生用饮用水层析2BV，放出树脂；

（2.2）放出后的树脂用20%盐酸溶液50L浸泡1.5-2.5小时；

（2.3）浸泡后用饮用水清洗2-4遍，沥干后，用3%-5%氢氧化钠溶液60-100L浸泡1.5-2.5小时；

（2.4）将浸泡后的树脂饮用水清洗至pH=6-8，沥干，然后按树脂：水（v/v）=1:1加入饮用水，装柱备用；

（2.5）树脂每柱洗脱10批，然后按 （2.1）-（2.4）步骤强化再生树脂一次。

进一步地，流动相按照甲醇：三氯：纯水=30:80:8（V:V:V）的比例进行配比。

进一步地，层析缓冲液按照甲醇：三氯：纯水=40:70:5（V:V:V）的比例进行配比。

本发明与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：

（1）本发明在纯化步骤中分为粗纯化步骤和精纯化步骤，与现有技术相比，单唾液酸四己糖神经节苷脂钠制备的纯度更高；

（2）本发明在树脂层析步骤中使用的树脂，采用特定的酸碱处理以及清洗过程，而且对树脂层析柱进行强化再生处理，使得树脂层析的效果更好。

具体实施方式

为使本发明的目的、工艺条件及优点作用更加清楚明白，结合以下实施实例，对本发明作进一步详细说明。此处所描述的具体实施实例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1：

一种单唾液酸四己糖神经节苷脂钠的制备方法，包括以下步骤:

（1）以鲜猪脑为原料进行搅拌，得到鲜猪脑的浓缩液；

（2）对制备的浓缩液进行树脂层析，并抽滤干燥得到浓缩粉：

（3）硅胶粗纯化步骤：将浓缩粉溶于由甲醇、三氯和纯水制备的流动相，然后进行硅胶层析，沉淀干燥得到粗品浓缩粉；

（4）硅胶精纯化步骤：将粗品浓缩粉溶于由甲醇、三氯和纯水制备的层析缓冲液中，然后进行硅胶层析，沉淀干燥得到精品浓缩粉。

其中，步骤（3）中溶样（浓缩粉溶于流动相）按每柱2.0kg上样量在溶解在溶样桶中，按1:5（W/V）比例加入流动相浸泡不不低于12小时；开启搅拌至溶解完全，彻底溶解样品，样品溶解后性状为黄色透明液体，密封备用；流动相按照甲醇：三氯：纯水=30:80:8（V:V:V）的比例进行配比；层析缓冲液按照甲醇：三氯：纯水=40:70:5（V:V:V）的比例进行配比；

硅胶层析的步骤为：