[发明专利]一种酵母培养物的制备方法

权利要求书

1.一种酵母培养物的制备方法，其特征在于，包括下列步骤：

步骤一：菌种制备与活化

把酵母菌加入无菌水中进行稀释，在固体平板培养基上对其进行涂布分离或划线分离，挑取部分单菌落进行生产能力的测定；经反复筛选，确定出经发酵产生的酵母菌活性强、活菌数高的菌株代替原来的菌株；

步骤二：斜面菌种制作

将斜面培养基加热使各组分充分溶解，然后分装于若干支试管中，密封试管；将试管灭菌，取出摆斜面，冷却后备用；向试管的斜面培养基中接入步骤一中制备的菌种，制成斜面菌种；

步骤三：三角瓶液体菌种制作

在无菌条件下，向三角瓶中的液体培养基中接入步骤二制得的斜面菌种，制得三角瓶液体菌种；

步骤四：种子罐液体菌种制作

向种子罐的液体培养基中接入步骤三制取的液体菌种，制得种子罐液体菌种；

步骤五：固体发酵

在无菌条件下，向固体培养基中接入步骤四制得的液体菌种及糖化酶，然后上发酵床上在28～30℃下进行固体发酵；

步骤六：袋内细胞厌氧自溶

将步骤五得到的料装入带有塑料膜内层的不透气的编织袋中，在编制袋中进行细胞厌氧自溶处理；

步骤七：低温干燥、粉碎

对步骤六得到的物料低温干燥、粉碎后制得成品，干燥、粉碎的温度不超过45℃。

2.如权利要求1所述的一种酵母培养物的制备方法，其特征在于：编制袋的容积为0.25-1.0立方米。

3.如权利要求1所述的一种酵母培养物的制备方法，其特征在于：装满料的编织袋放置在置物架上，置物架保持通风；编织袋外的空气温度控制在28～30℃，自溶时间控制在20～30小时。

4.如权利要求1所述的一种酵母培养物的制备方法，其特征在于：步骤1中，悬浮液的稀释浓度为10^-8。

5.如权利要求1所述的一种酵母培养物的制备方法，其特征在于：

步骤二的具体步骤为：

按配方要求配置斜面培养基，斜面培养基的各组份重量份为：葡萄糖28～35 g，蛋白胨5～7g，酵母膏2～4 g，琼脂粉20～25g，加水定容至1000mL；

将斜面培养基加热使各组分充分溶解，然后分装于若干支试管中，密封试管；将试管于115-130℃灭菌28-32min，取出摆斜面，冷却后备用；

将上述斜面培养基置于干燥箱或培养箱中放置24～48h接入步骤一中制备的菌种，其中酵母菌接种量为试管中混合物总重量的0.8～1.3%，在28～32℃条件下培养36～52h，制成斜面菌种。

6.如权利要求1所述的一种酵母培养物的制备方法，其特征在于：

步骤三的具体步骤为：

按配方要求配置液体培养基，液体培养基的各组份重量份为：葡萄糖100 ～110g，酵母浸粉18～23 g，硫酸镁1～1.2 g，磷酸二氢钾0.8～1.1 g， 加水定容至1000mL；分装于若干个500mL的三角瓶中，每支三角瓶装量为100m L；密封后在115～130℃温度下灭菌28～35min，冷却后备用；

在无菌条件下，每个三角瓶中的液体培养基接入步骤二制得的斜面菌种，其中酵母菌接种量为三角瓶中混合物总重量的8～13%，对三角瓶进行摇床培养，温度控制在28～32℃，转速为180～200 r/min；摇床培养18～30h后制得三角瓶液体菌种。

7.如权利要求1所述的一种酵母培养物的制备方法，其特征在于：

步骤四的具体步骤为：

按配方要求配置液体培养基，液体培养基的各组份重量份为：葡萄糖28～35kg，酵母浸粉5～7kg，硫酸镁0.3～0.5kg，磷酸二氢钾0.25～0.35kg， 加水定容至300L；密封后在115～130℃温度下灭菌28～35min，降温至28～35℃接入步骤三制取的液体菌种，其中酵母菌接种量为混合物总重量的12～17%，温度控制在28～30℃，通气量5～7m³/h，培养18～24h后制得种子罐液体菌种。