[发明专利]生产米尔贝霉素的重组链霉菌及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种重组链霉菌，相对于相应的野生型链霉菌或者产生该重组链霉菌的起始链霉菌，所述重组链霉菌选自如下的任一个、任两个或全部三个基因是失活的：

(i)编码SEQ ID NO：8所示氨基酸序列的基因mpca2；

(ii)编码SEQ ID NO：9所示氨基酸序列的基因mpca3；

(iii)编码SEQ ID NO：10所示氨基酸序列的基因mpca4。

2.权利要求1的重组链霉菌，其中所述任一个、任两个或全部三个基因是被敲除的。

3.权利要求1的重组链霉菌，其选自重组米尔贝霉素链霉菌(Streptomycesmilbemycinicus)、重组冰城链霉菌(Streptomyces bingchenggensis)、重组吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)和重组灰产色链霉菌(Streptomycesgriseochromogenes)。

4.权利要求1-3任一项的重组链霉菌，其是重组吸水链霉菌金泪亚种(Streptomyceshygroscopicus subsp.aureolacrimosus)。

5.权利要求1-3任一项的重组链霉菌，其是以保藏号CGMCC No.7677保藏在CGMCC的米尔贝霉素链霉菌的重组菌株，其中相对于CGMCC No.7677链霉菌，所述重组菌株中的基因mpca2、基因mpca3和基因mpca4的任一个、任两个或全部三个是失活的。

6.权利要求1-3任一项的重组链霉菌，其中所述重组链霉菌的基因组中选自如下的一个或多个核苷酸序列是缺失或敲除的：

(i)SEQ ID NO：7所示的974-2452位核苷酸或SEQ ID NO：7所示的x-y位核苷酸，其中x是974至1581的任一整数，y是1834至2452的任一整数，

(ii)SEQ ID NO：7所示的2449-3606位核苷酸或SEQ ID NO：7所示的x-y位核苷酸，其中x是2449至2894的任一整数，y是3305至3606的任一整数，

(iii)SEQ ID NO：7所示的3828-4892位核苷酸或SEQ ID NO：7所示的x-y位核苷酸，其中x是3828至3889的任一整数，y是4495至4892的任一整数。

7.权利要求6的重组链霉菌，其中所述重组链霉菌的基因组中选自如下的一个或多个核苷酸序列是缺失或敲除的：

(i)SEQ ID NO：7所示的1581-1834位核苷酸，

(ii)SEQ ID NO：7所示的2894-3305位核苷酸，

(iii)SEQ ID NO：7所示的3889-4495位核苷酸。

8.一种产生重组链霉菌的方法，包括失活链霉菌中选自如下的任一个、任两个或全部三个基因：

(i)编码SEQ ID NO：8所示氨基酸序列的基因mpca2；

(ii)编码SEQ ID NO：9所示氨基酸序列的基因mpca3；

(iii)编码SEQ ID NO：10所示氨基酸序列的基因mpca4。

9.权利要求8的方法，其中敲除所述任一个、任两个或全部三个基因。

10.权利要求8的方法，其中所述链霉菌选自米尔贝霉素链霉菌、冰城链霉菌、吸水链霉菌和灰产色链霉菌。

11.权利要求10的方法，其中所述链霉菌选自吸水链霉菌金泪亚种和以保藏号CGMCCNo.7677保藏在CGMCC的米尔贝霉素链霉菌。