[发明专利]一种芦笋全雄育种方法

说明书

本发明涉及一种芦笋全雄育种方法，属于植物育种技术领域。该方法的主要步骤为：对普通二倍体芦笋植株进行染色体加倍获得四倍体植株，之后对四倍体雄性植株进行花药培养获得二倍体超雄株，再以超雄株为父本、优良雌株为母本进行杂交组配，获得F1代全雄杂交品种。利用该方法进行芦笋全雄品种的选育，操作性强、效率高、结果可靠。

技术领域

本发明属于植物育种技术领域，具体涉及一种芦笋全雄育种方法。

背景技术

现有技术对二倍体植株进行花药培养，单倍体诱导率极低，仅为10%以下；并且对二倍体植株进行花药培养获得的单倍体植株，由于染色体缺失一半，生活力低，定植成活率仅为30%以下。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种芦笋全雄育种方法。本方法首先对二倍体芦笋植株进行染色体加倍，获得四倍体材料，之后对四倍体雄性材料进行花药培养，从而获得二倍体超雄株，大大提高超雄株的诱导率，同时获得的二倍体超雄株生活力强，易成活。通过超雄株与雌株杂交组配，从而获得全雄芦笋新品种，这对芦笋产业发展具有重要意义。

为实现上述目的，本发明所采取的技术方案为：

一种芦笋全雄育种方法，包括以下步骤：

（1）芦笋四倍体植株的获得：采用质量浓度0.08%-0.12%秋水仙素对苗龄30-40d的健壮芦笋秧苗嫩茎顶端进行处理，8-12d后筛选出具有40条染色体的秧苗，即四倍体；

（2）四倍体植株的种植：将获得的苗龄70-80d的四倍体秧苗定植于大田，常规栽培管理；

（3）四倍体植株的花药培养：待四倍体植株开花后，选取长势健壮的雄性单株，采集其单核靠边期的花药进行花药培养，获得二倍体超雄株材料；

（4）杂交与全雄杂交种的获得：以获得的二倍体超雄株材料为父本，高产、优质、抗病、雌性单株为母本进行杂交授粉，收获的种子即为全雄新品种。

进一步地，步骤中（1）中采用浸透质量浓度0.08-0.12%秋水仙素溶液的脱脂棉包裹芦笋秧苗嫩茎顶端48-54h，之后清水冲洗干净。优选的，采用浸透0.1%秋水仙素溶液的脱脂棉包裹芦笋秧苗嫩茎顶端48-54h，之后清水冲洗干净。

进一步地，步骤中（3）中采集的四倍体花药在2-4℃、避光条件下预处理3-4d。

进一步地，步骤中（3）中花药培养的愈伤组织诱导培养基为：1/2MS+NAA2.0mg/L+6-BA1.0mg/L；培养条件为：32-33℃条件下避光培养2-3d，之后转移至25-26℃、1800-2000Lx条件下培养，每天光照8-10h，直至愈伤组织出现。

进一步地，步骤（3）中芽分化培养基为：MS+NAA0.1mg/L+6-BA1.5mg/L，将获得的愈伤组织转移至芽分化培养基上，28-30℃、2000-2500Lx条件下培养，每天光照8-10h，进行芽诱导，直至芦笋幼苗高度4-6cm。

进一步地，将获得的芦笋幼苗先转移至MS+2,4D0.05mg/L+KT0.5mg/L +IAA0.5mg/L+嘧啶醇0.5mg/L培养基上，诱导根原基；之后再转移至MS+IBA1.0mg/L+KT0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L+嘧啶醇1.5mg/L培养基上培养，直至生根。

与现有技术相比，本发明取得的有益效果为：

1、显著提高花药培养诱导效率，现有技术对二倍体植株进行花药培养，单倍体诱导率极低，仅为10%以下。而本技术对四倍体植株进行花药培养，获得半数染色体再生植株的诱导率为48.1%。