[发明专利]一种肿瘤组织体外保存液及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种肿瘤组织体外保存液及其制备方法。

背景技术

人源肿瘤移植瘤(Patient-Derived Xenograft，PDX)模型，是把癌症病人的肿瘤块直接移植到小鼠体内从而生长出来肿瘤的模型。由于其与真实临床高度相符，能准确地反映其来源肿瘤病人的病理特征以及药物反应，因而成为各大制药公司抗癌药物开发的首选模型。PDX模型的构建需要新鲜的人活体肿瘤组织样本，因此为了保证移植的成功率，在肿瘤组织移植实验过程中，需要采用保存液来维持移植过程中肿瘤组织的生物活性，以提高移植的成功率。

目前常见的肿瘤组织体外保存液为磷酸缓冲盐溶液(Phosphate Buffer Saline，PBS)和细胞培养液。其中，PBS缓冲液的主要成分包括磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠和氯化钾等，具有盐平衡、可调整的适宜的pH缓冲作用；细胞培养液的主要成分包括基础培养基、牛血清、抗生素等，可用来维持细胞的生长增殖。

本申请的发明人在长期的研发过程中发现，PBS缓冲液成分简单，但功能局限，不能很好地保持体外肿瘤组织的生物活性；细胞培养液主要用来维持细胞的生长增殖，不是作为肿瘤组织保存液的最佳选择。以上二者作为肿瘤组织体外保存液时，保留肿瘤细胞的活性有限，而且体外保存时间越长，肿瘤细胞活性越差，从而致使肿瘤组织移植的成功率很低。

发明内容

本发明主要解决的技术问题是提供一种肿瘤组织体外保存液及其制备方法，能够维持体外肿瘤组织的生物活性，延长体外肿瘤组织的保存时间，从而提高肿瘤移植的成功率。

为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：提供一种肿瘤组织体外保存液，所述保存液包括基础培养基、抗生素、天然培养基、牛磺酸以及聚乙二醇辛基苯基醚。

为解决上述技术问题，本发明采用的另一个技术方案是：提供一种肿瘤组织体外保存液的制备方法，所述方法包括：在基础培养基中加入抗生素得到A液；在天然培养基中溶解牛磺酸，再加入聚乙二醇辛基苯基醚得到B液；将B液加入A液中并混匀，得到肿瘤组织体外保存液。

本发明的有益效果是：区别于现有技术的情况，本发明提供的肿瘤组织体外保存液包括基础培养基、抗生素、天然培养基、牛磺酸以及聚乙二醇辛基苯基醚。其中，基础培养基、抗生素为肿瘤组织提供基础的生长条件，同时抑制真菌和细菌的生长，能够维持肿瘤组织的形态结构和生物活性；天然培养基、牛磺酸以及聚乙二醇辛基苯基醚则为肿瘤细胞的生存提供丰富的营养物质，同时促进肿瘤细胞对营养物质的吸收，对肿瘤组织起到保护、促进生长和调控作用。以上二者共同作用使得肿瘤组织在保存液中能够维持其形态结构和生物活性，延长肿瘤组织在体外保存的时间，进而提高肿瘤移植的成功率。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。其中：

图1是本发明肿瘤组织体外保存液的制备方法一实施方式的流程示意图；

图2是利用本发明肿瘤组织体外保存液建立的PDX原始病人肿瘤以及传递三代后的肿瘤组织的病理图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性的劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明肿瘤组织体外保存液第一实施方式，包括基础培养基、抗生素、天然培养基、牛磺酸以及聚乙二醇辛基苯基醚。