[发明专利]一种芫花茎段外植体初代组织培养基

权利要求书

1.一种芫花茎段外植体初代组织培养基，其特征在于，包括如下组分：MS+0.1mg·L^-1NAA+1.0-1.5mg·L^-1ZT，加入蔗糖20-30g/L、琼脂6.5-7g/L，调整酸碱度至pH＝5.7-5.8。

2.根据权利要求1所述的初代组织培养基，其特征在于，包括如下组分：MS+0.1mg·L^-1NAA+1.5mg·L^-1ZT，加入蔗糖30g/L、琼脂7g/L，调整酸碱度至pH＝5.8。

3.根据权利要求1所述的初代组织培养基，其特征在于，所述初代组织培养基用于芫花茎段外植体的初代组织培养方法，包括如下步骤：

(1)芫花外植体的选取：采集生长健壮，腋芽饱满，无病虫害的芫花当年生枝条，去除全部叶片，剪截成8～10cm带腋芽茎段作为外植体；

(2)芫花外植体的处理：将外植体用洗衣粉溶液浸泡洗涤15～20分钟，接着用流水冲洗8～12小时，在无菌环境下将外植体剪成4-5cm茎段进行消毒处理；消毒后用无菌水冲洗，将茎段剪成1.5～2.5cm的长度，接入芫花茎段外植体初代组织培养的培养基中；

(3)芫花外植体的培养：将步骤(2)接入初代培养基中的外植体置于培养室的培养架进行光照培养，直至诱导丛生芽萌发。

4.根据权利要求3所述的初代组织培养基，其特征在于，步骤(2)所述洗衣粉溶液浸泡洗涤时间为15～20min，接着用流水冲洗时间为8～12h。

5.根据权利要求3所述的初代组织培养基，其特征在于，步骤(2)所述消毒为先采用乙醇溶液进行消毒，再将茎段放入升汞加吐温的混合溶液浸泡消毒。

6.根据权利要求5所述的初代组织培养基，其特征在于，所述乙醇溶液体积分数70～75％，消毒时间为30～45s，升汞加吐温混合溶液为1g·L^-1升汞加3-5滴吐温80，浸泡时间为10～14min。

7.根据权利要求3所述的初代组织培养基，，其特征在于，步骤(3)所述光照培养的温度22～25℃，光照强度2000～3000lx，相对湿度70-75％，光周期14h昼/10h夜。

8.根据权利要求3所述的初代组织培养基，，其特征在于，步骤(3)所述光照培养的时间25～30d。