[发明专利]一种用于检测霉菌性阴道炎的培养液、试剂盒及检测方法

说明书

本发明公开了一种用于检测霉菌性阴道炎的培养液，100ml培养液中含有：0.1～3g胰蛋白胨；1～5g葡萄糖；0.1～3g酵母提取物；0.01～1g溴百里酚蓝；0.00001～0.0001g头孢曲松钠；0.00001～0.0001g硫酸链霉素。本发明还公开了检测霉菌性阴道炎的试剂盒及检测方法。本发明的检测试剂盒质量稳定，检测方法操作简单、结果精准。本发明试剂盒具备靶向培养和同时同步检测药物的敏感性，6‑24小时内一步完成，检出率高能够满足临床精准诊断霉菌性阴道炎及药物敏感性试验，为临床医生及时精确诊断和合理使用药物提供参考依据，避免临床滥用抗生素。

技术领域

本发明属于微生物诊断技术领域，具体涉及一种检测霉菌性阴道炎的培养基、检测试剂盒及检测方法。

背景技术

目前对霉菌性阴道炎的检测以传统方法为主，常用镜检观察，金标准方法是培养、分离鉴定，但步骤复杂、检测周期长，分离率不高，整个过程大约4-7天，操作繁琐，已不能满足对快速、便利检测的需要，而且当样本中杂菌较多时会影响真正目标菌的识别。

霉菌性阴道炎的临床检测方法如培养检测法，其检出率低且时间长、操作复杂，因为传统培养基基本上都是使用沙保弱琼脂培养基，其采用琼脂作为凝固剂适合固体平板培养，但其营养成分低，培养时间24～48小时，临床使用不便；临床培养时，培养基不具有靶向功能，常有较多杂菌生长，对下一步菌落筛选操作造成较大障碍；菌落需人工挑选再纯化鉴定，对人员要求较高，步骤较繁琐；使用前需要灭菌消毒再倒成平皿板，步骤复杂，成品平皿保存温度在2-8℃，有效期只有7天。同时在进行药物敏感性试验时，传统药敏检测方法必须在病原体分离鉴定后才能分别做每种药物敏感性试验，整个实验过程复杂时间长，需要72小时，且鉴定过程要求人员素质高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种营养成分高，培养时间短，具有靶向培养功能，且不需将病原体分离鉴定即可同时用于霉菌性阴道炎检测及药 敏检测的培养液、试剂盒及检测方法。

本发明的一种用于检测霉菌性阴道炎的培养液，其中每100ml培养液中，含有如下重量配比的组份：

0.1～3g胰蛋白胨；

1～5g葡萄糖；

0.1～3g酵母提取物；

0.01～1g溴百里酚蓝；

0.00001～0.0001g头孢曲松钠；

0.00001～0.0001g硫酸链霉素。

上述所述培养液的制备方法，其是向含有胰蛋白胨、葡萄糖、酵母提取物和溴百里酚蓝的混合物中加入灭菌纯化水混溶，高压灭菌，然后加入头孢曲松钠和硫酸链霉素，即得培养液。

本发明的一种用于检测霉菌性阴道炎的的试剂盒，包括干粉培养基、培养基稀释液和药敏板，所述干粉培养基为上述所述培养液的冻干粉，所述药敏板上设有培养置物台、阴性对照孔C^-、阳性对照孔C⁺、若干组药物试验孔，每组所述药物试验孔分为高浓度药物孔和低浓度药物孔。

所述培养基稀释液为灭菌纯化水。

本发明还提供了一种检测霉菌性阴道炎的检测方法，其是采用本发明上述所述的试剂盒。

本发明的一种检测霉菌性阴道炎的检测方法，具体包括下述步骤：

(1)药敏板的药物试验孔预先包被各种高低浓度的药物溶液；

(2)用培养基稀释液将干粉培养基稀释成液体培养基，汲取少量液体培养基到药敏板的阴性对照孔C^-；

(3)用无菌棉拭子取疑似霉菌性阴道炎病人生殖道分泌物，生理盐水稀释后，汲取少量到剩余液体培养基中混匀成菌液；