[发明专利]提高淡紫紫孢菌产白灰制菌素的发酵培养基及培养方法有效

专利信息
申请号: 201710178236.8 申请日: 2017-03-23
公开(公告)号: CN106967769B 公开(公告)日: 2021-04-23
发明(设计)人: 杨凡;史宣杰;马凯;蔡毓新;赵秀山;赵肖斌;唐艳领;王琰 申请(专利权)人: 河南省农业科学院园艺研究所
主分类号: C12N1/14 分类号: C12N1/14;C12R1/645
代理公司: 河南科技通律师事务所 41123 代理人: 樊羿;韩松
地址: 450002 河*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 提高 淡紫 紫孢菌产 白灰 菌素 发酵 培养基 培养 方法
【权利要求书】:

1.一种提高淡紫紫孢菌(Purpureocillium lilacinum)产白灰制菌素的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)摇瓶发酵培养

将活化的淡紫紫孢菌菌液接入摇瓶中培养,得到悬液后,再在转速为200rpm、温度为28℃的条件下震荡培养36~48h,至OD600=0.8~1.2,得摇瓶培养菌液;

(2)种子罐培养

在种子罐内设置提高淡紫紫孢菌产白灰制菌素的发酵培养基,所述发酵培养基中含有以下浓度的原料:葡萄糖50.0g/L、蛋白胨5.0g/L、酵母提取物5g/L、K2HPO4 1.0g/L、Na2CO310.0g/L、MgSO4·7H2O 0.2g/L、玉米粉3g/L、FeSO4·7H2O 0.047g/L和尿素5g/L;所述发酵培养基的pH值为7.8~8.0;

将步骤(1)所得摇瓶培养菌液接入种子罐中,摇瓶培养菌液接种量为发酵培养基的1~3wt%,在通气量为1.4L/h、温度28℃、转速180rpm的条件下,发酵培养36~54h,至溶氧量下降到20~30%,得种子罐培养菌液;

(3)发酵按5~10wt%的接种量将所得种子罐培养菌液接种发酵罐,进行发酵;

发酵的参数控制如下:发酵中期,当溶氧量下降至50%时,将气液体积比调整为1.0~1.8;发酵后期,当溶氧量下降至50%时,将气液体积比调整为2.1~2.7,保持通气量,直至发酵结束,此过程中温度维持在25~30℃,转速200rpm;

所述通气量和温度的控制方法如下:开始发酵时,控制气液体积比为0.4~0.7;发酵中期,当溶氧量下降至50%时,将气液体积比调整为1.4~1.6;发酵后期,当溶氧量下降至50%,将气液体积比调整为2.1~2.3,保持通气量,直至发酵结束。

2.根据权利要求1所述培养方法,其特征在于:在所述步骤(1)中,所述摇瓶中的发酵培养基为马铃薯葡萄糖液体培养基,每升该培养基由马铃薯200g和葡萄糖20g加水定容,混合均匀,灭菌而成。

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