[发明专利]一种CHO DG44培养基及其应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种CHO DG44培养基及其应用。所述培养基的成分中含有：OPM‑CHO CD07、L‑Glutamine、F‑68、次黄嘌呤、胸腺嘧啶核苷、LONG^®R³IGF‑I、亚油酸、吡哆胺二盐酸盐。本发明的CHO DG44培养基，用于培养CHO DG44细胞时，从细胞倍增时间，细胞最高密度和细胞培养时间上，都优于国外某知名品牌的CD DG44培养基，完全可以替代国外某知名品牌CD DG44培养基，更有利于CHO DG44细胞的培养。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种CHO DG44培养基及其应用。

背景技术

动物细胞表达的单克隆抗体药物销售额迅速增长，作为商业化生产单抗的核心技术之一的大规模动物细胞悬浮培养成为抗体药物发展的新瓶颈。其中之一主要技术限制就是国内没有自己的高效能商业化动物悬浮培养基，而SIGMA、Invitrogen、Hyclone和Lonza等国际知名培养基，每升高达上千元，且配方保密，不利于后续的培养工艺优化。故研制出自主品牌且低成本的无血清无动物来源培养基，对工艺优化与反应器放大，以满足大量表达单克隆抗体的需求，对于抗体药物的产业化的意义是非常重大的。

市场上抗体药物70％以上都是由CHO DG44宿主细胞表达，是二氢叶酸还原酶缺陷型(DHFR-)中国仓鼠卵巢细胞。目前CHO DG44转染前培养基主要使用某知名品牌CD DG44培养基，是化学成分确定的、无蛋白培养基，专门设计用于DG44细胞的生长和悬浮培养条件下蛋白质的表达。

现希望发明一种国产新型CHO DG44培养基。

发明内容

为了克服现有技术中所存在的问题，本发明的目的在于提供一种CHO DG44培养基及其应用。

为了实现上述目的以及其他相关目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一方面，提供一种CHO DG44培养基，所述培养基的成分中含有：OPM-CHO CD07、L-Glutamine、F-68、次黄嘌呤、胸腺嘧啶核苷、R³IGF-I、亚油酸、吡哆胺二盐酸盐。

所述OPM-CHO CD07可通过商购途径从上海奥浦迈生物科技有限公司获得，货号为P081307-001。

所述L-Glutamine为L-谷氨酰胺，分子式为C₅H₁₀N₂O₃，分子量为146.14，CAS号为56-85-9。所述L-Glutamine可通过商购途径获得，例如，可从味之素或GIBCO购买获得。

所述F-68可通过商购途径获得，例如，可从GIBCO购买获得，货号为24040-032。

所述次黄嘌呤(hypoxanthine)可通过商购途径获得，例如可从SIGMA购买获得，货号为H9636-1G。

所述胸腺嘧啶核苷(thymidine)可通过商购途径获得，例如可从SIGMA购买获得，货号为T1895-1G。

所述R³IGF-I为人胰岛素样生长因子-I(IGF-I)的重组类似物，可通过商购途径获得，例如可从SIGMA购买获得，货号为91590C。

所述亚油酸的分子量为280.44、CAS号为60-33-3。所述亚油酸可通过商购途径获得，例如可从SIGMA购买获得，货号为L1012-100MG。

所述吡哆胺二盐酸盐的分子量为241.11、CAS号为524-36-7。所述吡哆胺二盐酸盐可通过商购途径获得，例如可从SIGMA购买获得，货号为P9158-1G。