[发明专利]一种四氧化三铁/奥曲肽修饰的纳米脂质体及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，特别涉及一种载药脂质体及其制备方法。

背景技术

当前，全世界由恶性肿瘤引起的死亡所占比率越来越高，而目前所拥有的治疗手段如化疗、放射疗法、手术治疗等手段对机体具有非常大的副作用，因此寻求一种安全、无毒副作用的癌症治疗手段仍然是全球癌症治疗面临的一大难题。

研究发现脂溶性抗肿瘤药物，除具有显著的抗肿瘤效果外，还具有多种生物学效应，如抗炎、抗氧化、抗病毒等，药学价值显著。但是其在体内的生物利用度较差，血液半衰期短，这些缺点使其应用受到限制。纳米脂质体是一种认可度较高的新型载体系统，由磷脂双分子层、胆固醇构成，疏水性药物包覆在磷脂双分子层之间，亲水性药物包覆在亲水性核心，可以提高包载药物生物利用度，且生物相容性良好。然而传统脂质体载药系统仍存在一定缺陷，如不能实现药物靶向运输和精准释放等。

发明内容

本发明的目的是提供一种制备方法简单、成本较低、重复性高、能高效靶向肿瘤组织或细胞，且提高肿瘤细胞对药物摄取率的四氧化三铁/奥曲肽修饰的纳米脂质体及其制备方法。

本发明主要是以包载脂溶性药物纳米脂质体为基础，在其上修饰L-谷氨酸，使脂质体带负电荷，在pH为6.0～7.5条件下，奥曲肽带正电，在温和条件下避光孵育，即可得到奥曲肽修饰的载药脂质体。

本发明的Fe₃O₄/奥曲肽脂质体是一种粒径大小为80-200nm，表面具有磁性Fe₃O₄纳米粒子的奥曲肽修饰的载药纳米脂质体。

上述Fe₃O₄/奥曲肽脂质体的制备方法如下：

(1)制备谷氨酸修饰的载药纳米脂质体

①原料：胆固醇、大豆卵磷脂、脂溶性药物、聚乙二醇-2000、吐温-80、L-谷氨酸；所述脂溶性药物为脂溶性天然来源抗肿瘤药物，如齐墩果酸、熊果酸、白桦脂酸等。

②将脂溶性药物、大豆卵磷脂、胆固醇按质量比1:12～40:1.4～4混合，按每毫升无水乙醇加入上述混合物22.5～36mg的比例，将它们磁力搅拌溶解于无水乙醇中形成脂相溶液；将聚乙二醇-2000、谷氨酸按质量比1:1～2混合，按每毫升磷酸缓冲液加入聚乙二醇-2000和谷氨酸混合物0.25～0.75mg的比例，将其溶解到磷酸缓冲液中作为水相溶液，用浓度为1mol/L NaOH溶液将水相溶液调节pH为6.0～7.5，由于谷氨酸在水溶液中为酸性，溶解后pH为4左右，偏酸性条件会影响脂质体形貌；再按每毫升水相溶液加入1～1.5μL吐温-80，以增加药物溶解性；

③将水相溶液水浴加热至30～50℃，到达相变温度，随后按脂相溶液与水相溶液的体积比1:4～6的比例，在磁力搅拌器搅拌下，将脂相溶液缓慢匀速逐滴滴入到水相溶液中，转速为80～150rpm，保证脂质体粒径大小在80-200nm范围内，得到脂质体悬液；最后继续旋转蒸发1.5～3小时除去无水乙醇，得到谷氨酸修饰的纳米脂质体；

(2)制备奥曲肽修饰的载药脂质体

①配制奥曲肽溶液：按每毫升去离子水加入2～6mg奥曲肽的比例，用去离子水溶解奥曲肽，超声振荡2～10min；

②采用共孵育法使奥曲肽修饰到载药脂质体上：按谷氨酸修饰的纳米脂质体与奥曲肽溶液体积比体积为1:1～3的比例，将步骤(1)得到的谷氨酸修饰的纳米脂质体与步骤①配制的奥曲肽溶液均匀混合，制得脂质体/奥曲肽混悬液；

③将步骤②制备的脂质体/奥曲肽混悬液置于摇床25～30℃，90～140rpm，孵育2～6h，使得谷氨酸修饰的脂质体充分与奥曲肽结合，从而得到奥曲肽修饰的载药纳米脂质体；

(3)制备Fe₃O₄/奥曲肽修饰的纳米脂质体

①制备Fe₃O₄纳米粒子