[发明专利]评价丙烯酰胺体内暴露的血红蛋白加合物检测方法及应用

说明书

本发明公开了一种评价膳食丙烯酰胺中长期体内暴露的血红蛋白加合物同步检测方法，该方法包括血液(大鼠血液和人体血液)的前处理方法、检测方法的色谱条件以及质谱条件。本发明采用了同位素稀释超高效液相色谱串联质谱法(UHPLC‑MS/MS)，对丙烯酰胺的两种血红蛋白加合物进行定量，分析时间大大缩短，同时使得AAVal‑PTH和两种GAVal‑PTH空间异构体得到较好的分离，实现同步检测，这能够更加全面的对丙烯酰胺的内暴露量进行评估。

技术领域

本发明涉及一种评价膳食丙烯酰胺中长期体内暴露的血红蛋白加合物同步检测方法及其应用，属于食品安全领域。

背景技术

2002年，瑞典国家食品管理局与斯德哥尔摩大学的研究人员共同宣称在油炸食品和焙烤食品中发现了高含量的丙烯酰胺(Acrylamide，AA)，并在随后的研究证明热加工食品中丙烯酰胺的形成源自美拉德反应(Swedish National Food Administration,Information about acrylamide in food,2002,4)，引起了国际社会的高度关注。丙烯酰胺是一种无色无味的白色晶体小分子物质，为一种重要的化工原料，工业用途广泛。人体摄入丙烯酰胺主要来自高碳水化合物含量的食品，如薯类油炸食品，焙烤类食品、消费快餐食品以及休闲类食品等。根据我国第五次膳食调查的研究表明，我国的膳食丙烯酰胺摄入主要来自烹饪蔬菜、谷物及薯类消费(Gao,J.,Zhao,Y.,Zhu,F.,Ma,Y.,Li,X.,Miao,H.,&Wu,Y.Dietary exposure of acrylamide from the fifth Chinese Total Diet Study.Foodand Chemical Toxicology 2016,87,97-102.)。

丙烯酰胺具有神经毒性、生殖毒性、基因毒性及致癌性。人体在丙烯酰胺亚慢性暴露(30μg/kg bw)条件下可能引起可逆的周围神经病变，如四肢无力、麻木、骨骼无力等，在长期暴露中会引发更严重状况。(WHO,2005)。丙烯酰胺在实验啮齿类动物中的生殖与发育毒性都得到了验证，表现为混乱交配、繁殖率下降、胎儿再吸收增加，怀孕雌鼠产崽量减少、雄鼠精子畸形和精子数量降低(Lineback&Jones,2011)。同时，也有文献报道了丙烯酰胺可能对人体存在基因毒性(Jiang et al.,2007；Parzefall,2008)。丙烯酰胺的致癌性早在1994年已经被国际癌症研究机构(IARC)列为2A类致癌物(对人类很可能有致癌性)。基于目前的现有研究，对丙烯酰胺的体内代谢动力学及毒理学的研究显得尤其重要，开发对膳食丙烯酰胺中长期体内暴露的血红蛋白加合物同步检测方法十分必要。