[发明专利]一种杂交构树组织培养快速繁殖方法

权利要求书

1.一种杂交构树组织培养快速繁殖方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

(一)组织培养阶段

1)外植体的消毒：取杂交构树新长出的嫩芽作为外植体后，用生汞0.1％浸泡3-5分钟，浸泡过程中不断振荡，浸泡后用无菌水冲洗3-4次，然后放置无菌接种盘在超净工作台上，将外植体表面的水分吹干，切去在消毒过程中坏死的周边组织，在超净工作台上将叶片用经过灭菌消毒手术刀切割成0.5-2cm小片待用；

2)培养基的培养：

①外植体诱导培养：将经步骤1)处理所得外植体接种于诱导培养基上培养，经过暗处理48小时后，在光照强度1300-1500lx，光照时间为12-14h/d，温度为22-25℃，PH值为5.6-5.8的条件下培养28-33天；

所述诱导培养基的成分为：MS+3.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA；

②继代增殖培养：将经过步骤①诱导培养的构树苗径段上的个腋芽切下，将腋芽接种到增殖培养基上进行继代增殖培养，于光照强度为1800-2200lx，光照时间为12-14h/d，温度为21-25℃，PH值为5.6-5.8的条件下培养30-35天；

所述增殖培养基的成分为：MS+1.1mg/L 6-BA+0.11mg/L NAA；

③生根培养：将经过步骤②继代增殖培养后的构树组培苗放于生根培养基上进行生根培养，培养条件为：光照强度2000-2500lx，光照时间10-12小时/d，温度25-28℃，培养15-20天后即可出瓶炼苗；

所述生根培养基的成分为：1/3MS+0.1mg/L 6-BA+4.8g/L卡拉胶+1g/L琼脂+30g/L蔗糖；

3)大棚炼苗：将经过组织培养的构树苗由培养基中取出，用自来水将小苗根部的培养基洗净，用稀释1000倍的多菌灵或百菌清溶液浸泡10-20分钟，然后种植到混有园土、河沙及少量珍珠岩的培养土苗盘里并喷淋定根水，园土、河沙、珍珠岩的比值是2:4:1，在植株上层套上塑料薄膜保水，保持湿度为75-90％，温度23-26℃，培养20-30天后即可移栽大田；

(二)移栽大田阶段

(1)播种：经大棚炼苗后，弃去黄化和发育不良的种苗，整理出健康种苗放入事先挖好的穴中，每穴放苗一株，放苗时使其根自然展开，覆土过根茎，同时保证枝干与主根的结合部分露出土外，覆土完成后将土压实，并浇灌定根水；

(2)施肥管理：移栽大田2个月后进行初次施肥，初次施肥7-10天后对叶面喷施营养液进行追肥；所用肥料为农家肥与生态肥按照比例为1-3:2-5混合，施肥时间为每年4-8月份，每年施肥4-6次，施肥结合中耕除草进行；每1-2月用营养液进行叶面喷施一次；所述营养液是将20-30重量份的砂土、5-10重量份的草木灰与10-18重量份的蛭石混合后浸泡在60-80重量份的水中，浸泡2天后将其过滤，取液体加入10-15重量份的沼液混合搅拌均匀即可；

所述农家肥为家禽粪便；所述生态肥所述生态肥通过将20-40的重量份的尿素置于容器中，掺拌5-10的重量份乌龟壳、1-8重量份的白砂糖、5-10的重量份椰树皮、7-12重量份的榕树枯枝、7-12重量份的荷花杆、7-12重量份的山野豌豆藤、5-10重量份的野韭菜、7-12重量份的皂荚树枯枝以及3-8重量份的纤维素酶，再浇入10-30重量份的水，然后进行堆沤，待原料全部腐烂变成腐烂质土后得到的。

2.根据权利要求1所述的一种杂交构树组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述组织培养阶段还包括外植体的采集步骤，具体为：选择4-6月份的晴天或阴天进行采集，于上午的9-11点之前，采摘生长健壮、发育正常、无病虫害、半木质化的杂交构树嫩芽，去除杂质备用。

3.根据权利要求1所述的一种杂交构树组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述移栽大田阶段还包括整地的步骤，具体为：在种植前1-2个月经深翻耕后添加土壤调节剂将土壤pH值调节为5.7-6.6，将碎土耙平，施埋基底肥，按行距1.5-2.0m、株距1.5-2.2m挖穴，并在每个穴内施埋基底肥。