[发明专利]一种杠柳苷元的生物转化制备方法

权利要求书

1.一种杠柳苷元的生物转化制备方法，其特征在于所述方法是以黑曲霉(Aspergillusniger)HC306发酵培养获得的发酵液经抽滤后的滤液为催化剂，以香加皮为原料构成转化体系，在30～35℃、150～250r/min恒温振荡条件下进行转化反应，反应结束后，将反应液过滤，滤饼干燥后分离纯化，获得杠柳苷元。

2.如权利要求1所述杠柳苷元的生物转化制备方法，其特征在于所述转化体系中，香加皮的终浓度为50～100g/L转化体系，所述催化剂用量以抽滤前发酵液中干菌体重量计为6～8g/L转化体系。

3.如权利要求1所述杠柳苷元的生物转化制备方法，其特征在于所述香加皮在加入转化体系前先烘干粉碎过60目筛。

4.如权利要求1所述杠柳苷元的生物转化制备方法，其特征在于所述转化反应时间为8～12h。

5.如权利要求1所述杠柳苷元的生物转化制备方法，其特征在于所述黑曲霉HC306发酵培养方法为：

(1)活化培养：将黑曲霉HC306菌种孢子接种于PDA培养基，于28～30℃恒温培养2～3d，获得平板孢子，所述的PDA培养基组成为：马铃薯100～200g/L，蔗糖10～20g/L，琼脂15～20g/L，溶剂为水，pH自然；

(2)种子扩大培养：挑取步骤(1)活化培养后黑曲霉HC306孢子接种至种子培养基中，于28～30℃、200～250r/min恒温振荡条件下培养2～3d，得种子液；所述种子培养基组成为：蔗糖10～20g/L，(NH₄)₂SO₄ 3～5g/L，酵母浸出粉2～3g/L，KH₂PO₄ 1g/L，MgSO₄ 0.5g/L，CaCl₂ 0.1g/L，溶剂为自来水，pH 5～6；

(3)发酵培养：将步骤(2)制备的种子液以体积浓度5～10％的接种量接种至发酵培养基中，于28～30℃、200～250r/min恒温振荡条件下培养2～3d，获得发酵液，将发酵液用4层纱布过滤，滤液即为催化剂；所述发酵培养基组成同种子培养基。