[发明专利]一种双价酵母菌细胞的破壁方法

权利要求书

1.一种双价酵母菌细胞的破壁方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、菌种选育：选取活化斜面上的原始酵母菌株，接种入YEPD固体培养基中培养扩增，将扩增后的酵母菌株转接至淀粉培养基中，筛选优势酵母菌株；

S2、培养：首先将S1得到的酵母菌株接种至种子培养基中，旋转式振动培养，其次再接种至摇瓶培养基中，旋转式振动培养，最后在置有固体发酵培养基的培养池中进行发酵；

S3、酶解：采用复合酶对S2中的酵母菌株细胞壁进行酶解，所述复合酶为甘露聚糖酶、蛋白酶和β-1，3-葡聚糖酶；

S4、钝化与干燥：S3中经过酶解打孔后的酵母菌株采用闪蒸法进行低温干燥；

S5、机械温和破碎：将干燥钝化后的酵母菌株装入离心式粉碎机，进行细胞破碎；

所述步骤S1中，原始酵母菌株为产朊假丝酵母、白地霉、热带假丝酵母和酿酒酵母；

所述步骤S1中，所述YEPD固体培养基：酵母膏0.5～1.5％，蛋白胨1.0～3.0％，葡萄糖1.0～3.0％，琼脂1.5～2.0％；所述淀粉培养基：酵母膏0.5～1.5％，蛋白胨1.0～3.0％，淀粉1.0～2.0％，琼脂1.5～2.0％；

所述步骤S2中，所述种子培养基：淀粉1.0～3.0％，蛋白胨0.1～1.0％，麦芽汁0.1～0.5％，酵母膏0.1～0.5％；

所述摇瓶培养基：淀粉5.0～10.0％，酵母膏0.5～1.5％，尿素0.1～1.0％，硫酸镁0.01～0.10％，氯化钠0.005～0.015％，氯化钙0.005～0.015％，磷酸二氢钾0.005～0.015％；

所述固体发酵培养基：麸皮50～80％，玉米粉10～15％，豆粕粉25～30％，碳酸钙1～6％，硫酸铵0.1～1.0％，硫酸镁0.01～0.10％，硫酸锰0.001～0.01％；

所述步骤S2中，发酵pH值为4.0～6.0，发酵时间为35～40h，发酵温度为25～35℃；

所述步骤S2中，培养池的通气量为30～90m³/min；

所述步骤S2中，固体发酵培养基中还包括磷酸氢二钾0.05～0.15％，磷酸二氢钾0.5～1.5％，硫酸铵0.1～1.0％，钙锰锌镁盐0.1～0.5％；

所述步骤S3中，所述复合酶为甘露聚糖酶、蛋白酶和β-1，3-葡聚糖酶的质量比为1～3:1:2～4；

所述步骤S4中，干燥温度为50～65℃；

所述步骤S5中，所述离心式粉碎机的外围筛网目数为60～100。