[发明专利]一种高效大规模鉴定大豆种质对传粉昆虫吸引力的方法

权利要求书

1.一种高效大规模鉴定大豆种质对传粉昆虫吸引力的方法，其特征在于：

在同一微型试验小区内不育系与其同型保持系或可育种质以多种特定种植方式相邻种植，不同微型试验小区播种不育系与其同型保持系或不同可育种质，设三次重复；开花期，通过大豆不育系及可育系自身吸引野生传粉昆虫不间断选择授粉，用不育系结荚率或结实数直接表示传粉昆虫完成授粉情况，不育系结荚多少，代表野生传粉昆虫在不育系及可育系间活动活跃程度，即为大豆种质对传粉昆虫吸引力的高低；测定不育系对传粉昆虫吸引力时，在鼓粒期至成熟期调查不育系及其同型保持系结荚数，并计算其结荚率，依据结荚率的高低鉴定获得不育系及其保持系昆虫吸引力的强弱，测定可育种质对传粉昆虫吸引力时，在鼓粒期至成熟期仅调查不育系结荚数，依据不同微型小区内不育系结荚数的高低鉴定获得对应可育种质对传粉昆虫吸引力的强弱；

具体步骤如下：

1）鉴定材料选择：鉴定材料为大豆不育系及其同型保持系；

2）试验地的选择：在干旱少雨，野生传粉昆虫较为丰富的地区，选择土壤肥力均匀，适合种植大豆，没有逆境因子的地块做鉴定用地；

3) 试验设计：采用随机区组，三次重复，在播种季节，在田间微型试验小区内，不育系与其同型保持系相邻种植，具体种植方式如下：

种植方式一，在鉴定不育系时，小区大小为1.3m×2.0m，相邻小区间距0.65-1.0m，小区内2行播种，行距0.60-0.70m，被测不育系与其同型保持系在行上左右相邻种植，间距5-30cm，被测不育系间或同型保持系间穴距10-40cm，播种方式为穴播，播种量为每穴2-6粒，出苗后每穴统一定苗为1或2株；

种植方式二：小区大小为1.95m×2.0m，相邻小区间距0.65-1.0m，小区内3行播种，行距0.60-0.70m，第1、3行播种被测不育系的同型保持系，中间行播种被测不育系，播种方式为穴播，穴距10-40cm，播种量为每穴2-6粒，出苗后每穴定苗为1或2株；

种植方式三：小区大小为1.3m×2.0m，相邻小区间距0.65-1.0m，小区内2行播种，行距0.60-0.70m，被测不育系与同型保持系在同一行上前后相间种植，播种方式为穴播，穴距15-40cm，播种量为每穴2-6粒，出苗后每穴定苗为1或2株；

4)试验地田间管理：

出苗后的田间管理同大豆生产田，开花前及时进行除草除虫，开花后禁止施用杀虫剂，避免对传粉昆虫造成危害，影响传粉及结实；

5）花粉育性检查：

在被测不育系开花期，根据不同种植方式不育系的播种位置选取不育系进行花粉败育率检查，拔出可育植株，种植方式三同时标记不育株；

6）结荚数调查统计：

在被测不育系及同型保持系鼓粒期至成熟期，在每个小区中间位置对被测不育系及同型保持系分别取样，每行连续取5穴或10株母本不育系和相同株数的同型保持系，调查结荚数，计算平均结荚数；以被测不育系与同型保持系平均结荚数的比值，计算被测不育系昆虫传粉异交结荚率；

7）获得高昆虫吸引力不育系：

对异交结荚率从高到低排序，按既定选择压力，选出一定比例的高度吸引昆虫的被测不育系，供杂交组合选育及杂交种生产应用。

2.一种高效大规模鉴定大豆可育种质对传粉昆虫吸引力的方法，其特征在于：

以昆虫传粉结实性高的早熟、中熟或晚熟不育系为母本测验种，以早熟、中熟或晚熟被测种质为父本，测验种与被测种质在微型试验小区内以多种特定种植方式相邻种植，设三次重复，整个开花期，通过野生传粉昆虫不间断选择授粉，在鼓粒期至成熟期调查各小区母本测验种单株结荚数量，通过分析各小区测验种单株结荚数高低差异，确定被测种质对传粉昆虫吸引能力的高低，筛选出高度吸引传粉昆虫的大豆种质，进一步选育昆虫传粉结实性高的大豆恢复系、保持系及不育系；

具体步骤如下：

1）测验种的选择：鉴定可育大豆种质对传粉昆虫吸引力时，选择与被测可育种质熟期组相同、育性稳定、昆虫传粉结实性高的不育系做母本测验种，多个被测可育种质做父本；

2) 试验地的选择：在干旱少雨，野生传粉昆虫较为丰富的地区，选择土壤肥力均匀，适合种植大豆，没有逆境因子的地块做鉴定用地；

3）田间种植方式：

鉴定可育大豆种质对传份昆虫的吸引力：试验采用随机区组设计，三次重复，在播种季节，在每个微型小区内，测验种与1份被测种质相邻种植，具体种植方式如下：

种植方式一：在鉴定可育种质时，小区大小为1.3m×2.0m，相邻小区间距0.65-1.0m，小区内2行播种，行距0.60-0.65m，测验种与1份被测种质在行上左右相邻种植，二者间距10-30cm，测验种间或被测种质间穴距15-40cm，播种方式为穴播，播种量为每穴2-6粒，出苗后每穴定苗为1或2株；

种植方式二：小区大小为1.95m×2.0m，相邻小区间距0.65-1.0m，小区内3行播种，行距0.60-0.70m，第1、3行播种1份被测种质，中间行播种测验种，播种方式为穴播，穴距15-40cm，播种量为每穴2-6粒，出苗后每穴定苗为1或2株；

种植方式三：小区大小为1.3m×2.0m，相邻小区间距0.65-1.0m，小区内2行播种，行距0.60-0.70m，测验种与1份被测种质在行上前后相间种植，播种方式为穴播，穴距15-40cm，播种量为每穴2-6粒，出苗后每穴定苗为1或2株；

种植方式四：小区大小为1.3m×2.0m，相邻小区间距0.65-1.0m，小区内2行播种，行距0.60-0.70m，测验种种子与1份被测种质种子等量混合后在行上播种，播种方式为穴播，穴距15-20cm，播种量为每穴2-6粒，出苗后每穴定苗为1或2株；

4）田间管理：

出苗后的田间管理同大豆生产田，开花前及时进行除草除虫，开花后禁止施用杀虫剂，避免对传粉昆虫造成危害，影响传粉及结实；

5）花粉育性检查：

在测验种和被测不育系开花期，根据不同种植方式下测验种或不育系的播种位置选取测验种进行花粉败育率检查，拔出可育植株，针对种植方式四，可依据测验种的表型遗传特征：花颜色，茸毛颜色，叶片形状等，在田间选择不育系进行育性检查，同时标记不育株；

6）结荚数调查统计：

测验种鼓粒期至成熟期，在每个小区中间位置取样，每行连续取5穴或10株测验种不育系，调查结荚数，计算平均结荚数；以结荚数多少从高到底排序；

这个排序也是对应的相邻种植的被测种质对传粉昆虫吸引力大小的排序，结荚多者即代表相邻种植的被测种质对传粉昆虫的吸引力强，反之则弱；

筛选获得高昆虫吸引力可育种质：

按既定选择压力，选出一定比例的高度吸引昆虫的被测可育大豆种质，为选育高异交结实性大豆保持系、不育系及恢复系提供种质。