[发明专利]一种摘除小鼠松果体的实验动物模型构建方法及其应用

权利要求书

1.一种摘除小鼠松果体的实验动物模型构建方法，其特征在于外科手术步骤如下：

（1）暴露矢状缝和人字缝：取5~6周龄雄性C57BL/6小鼠麻醉、头顶部脱毛、局部消毒后固定于操作台上，在两耳正中间沿头顶部正中央，从枕骨向顶骨，沿矢状缝方向做一长10 mm的纵向切口至两眼之间；分离骨膜以暴露矢状缝和人字缝；

（2）颅骨切口：以人字缝为中心，在颅骨上用牙科机配牙科裂钻一切口ABCD；在此切口范围内再做一切割边EF，取下骨片CDEF，暴露硬脑膜及上矢状窦；

（3）双重结扎上矢状窦：沿AD、BC边切开硬脑膜，双重结扎上矢状窦；

（4）剪断后矢状窦，上矢状窦通过结扎的手术线以AB边为轴提起，同时带起颅骨骨片；

（5）灼烧松果体；

（6）将骨片放下，用含生理盐水棉球轻压数秒即可止血；

（7）缝合伤口，在伤口处滴加数滴青霉素钠以预防伤口感染。

2.根据权利要求1所述摘除小鼠松果体的实验动物模型构建方法，其特征在于所述颅骨切口，颅骨切口为一上底边AB长3 mm、下底边CD长4 mm、高4 mm的等腰梯形；AB位于枕骨，CD位于顶骨，用显微镊轻轻提起CD边，将5-0号缝合线置于CD边下方，左右手分别轻轻左右拉动手术线，紧贴硬脑膜钝性分离颅骨及硬脑膜至AB边，勿要剥离骨片；用显微镊夹住CD边，并以AB边为轴轻轻抬起约45°，用眼科剪剪去距CD边1 mm处的EF边，取出骨片CDEF，将骨片ABFE轻轻放下。

3.根据权利要求1所述摘除小鼠松果体的实验动物模型构建方法，其特征在于所述双重结扎上矢状窦，使用缝合针钝端由CF切口紧贴硬脑膜进入，在矢状窦下方穿过小鼠硬脑膜及大脑之间，由DE切口出，勿要取出缝合针；穿入100 mm长5-0号缝合线后，缝合针钝端由DE切口原路返回穿出CF切口，同时手术线由DE切口穿入CF切口穿出，双重结扎矢状窦。

4.根据权利要求1所述摘除小鼠松果体的实验动物模型构建方法，其特征在于所述灼烧松果体，左手提起结扎上矢状窦的手术线60°，右手同时持铁丝或拧紧的接种环在酒精灯火焰上方将铁丝或接种环烧红，骨片提起时可见松果体被硬脑膜带起，黏附在骨片上，此时将烧红的铁丝或接种环直接在骨片上灼烧松果体，肉眼可见松果体被去除。

5.用权利要求1～4所述方法之一摘除小鼠松果体的实验动物模型的应用，其特征在于用于松果体代谢研究，褪黑素分泌的研究。