[发明专利]一种ASE‑HPLC法测定红参中人参皂苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及化学检测领域，尤其是一种ASE-HPLC法测定红参中人参皂苷的方法。

背景技术

红参是中药的一种，属伞形目、五加科植物。红参是人参的熟用品，有大补元气，复脉固脱，益气摄血功效。红参用于体虚欲脱，肢冷脉微，气不摄血，崩漏下血；心力衰竭，心原性休克。红参是参的熟用品，有大补元气，复脉固脱，益气摄血功效。人参皂苷是红参的主要药效成分，人参皂苷具有增强记忆力，提高免疫力，改善心血管，调节内分泌，延缓衰老和抗肿瘤等功能，人参皂苷的含量测定已经成为国内外研究的热点。

随着社会的发展，对于药品质量控制的要求也越来越高，因此建立同时、多种、快捷、方便、可靠的人参皂苷检测方法对人参及其制剂的质量控制具有重要意义。

发明内容

针对上述不足，本发明旨在提供一种线性范围广、方法准确、重现性好、快捷简便、稳定可靠的ASE-HPLC法测定红参中人参皂苷的方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供的技术方案是这样的：一种ASE-HPLC法测定红参中的人参皂苷的方法，依次包括下述步骤：

步骤1：采用ASE萃取方法萃取粉碎过的红参样品并制备甲醇萃取液；

步骤2：采用HPLC法检测甲醇萃取液中的人参皂苷的含量。

进一步的，所述的步骤1包括下述子步骤：

步骤S1：将红参样品粉粹，过四号筛，取过筛后的粉末1g；

步骤S2：将1g红参粉末与1g硅藻土混合，装于放有纤维滤膜的10mlASE萃取池中，加硅藻土至与池口平行；

步骤S3：用甲醇萃取，蒸干，加甲醇溶解，并用甲醇定容至10ml；

步骤S4：取1ml步骤3所得溶液加入至已装有100mg PSA的2ml离心管中离心，过滤，得到甲醇萃取液。

进一步的，所述的步骤S3中，萃取参数为：萃取温度为120℃，萃取时间为8min，循环次数为3次，冲洗体积为60％，吹扫时间为60S。

进一步的，所述的ASE萃取方法采用美国DIONEX公司的ASE350快速溶剂萃取仪。

进一步的，步骤2所述的HPLC法的检测参数为：色谱柱：Thermo Syncronis Dim.(mm)AQ；柱温：40℃；流速：0.3mL/min；流动相：乙腈-水；检测波长：203nm。

进一步的，所述的流动相：乙腈-水的体积比为18～30：70～82；

第0分钟，流动相中乙腈-水的体积比为18：82；

第10分钟，流动相中乙腈-水的体积比为20：80；

第18-24分钟，流动相中乙腈-水的体积比为30：70；

第25-28分钟，流动相中乙腈-水的体积比为18：82。

进一步的，所述的HPLC法检测所使用的仪器为Thermo U3000UHPLC液相色谱仪。

进一步的，所述的色谱柱的规格为1.7μm，50×2.1mm。

本发明的有益效果如下：

本发明曾对甲醇、正己烷饱和的甲醇、50％乙醇等提取溶剂进行考察，结果显示采用正己烷饱和的甲醇提取样品杂质最少，但人参皂苷含量偏低，而采用50％乙醇和甲醇提取人参皂苷含量与使用药典方法提取的含量较一致，但50％乙醇提取后杂质峰比使用甲醇高很多，故采用操作简单的、成本低的甲醇作为提取溶剂。

本发明曾对净化条件进行考察，包括在萃取池底部加入适量的中性氧化铝和硅胶作为净化剂，结果发现在萃取池中添加净化剂提取出的杂质与未添加无明显差别，实验中还考察了在提取完样品后，使用提取液添加适量的C18、PSA、GCB进行净化再上机，结果发现PSA和C18净化对样品的含量基本无影响而GCB会对皂苷有吸附，而PSA净化效果最好，故采用PSA进行净化。

本发明所提供的测定方法在人参皂苷单体在0.5μl～3.0μl范围内呈现良好的线性关系。

附图说明

图1为人参皂苷Rg1以浓度(mg)-峰面积进行线性回归图；

图2为人参皂苷Re以浓度(mg)-峰面积进行线性回归图；

图3为人参皂苷Rb1以浓度(mg)-峰面积进行线性回归图。

具体实施方法

下面结合具体实施方式，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围内所做的有限次的修改，仍在本发明的权利要求保护范围之内。

实施例1

1.对照品溶液的制备：