[发明专利]一种双光子荧光染料及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种双光子荧光染料，其特征在于其结构式为：

2.一种权利要求1所述的双光子荧光染料的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)中间体1的合成

在圆底烧瓶中加入3,6-二碘咔唑2.095g、KOH 0.560g、对甲苯磺酸三缩乙二醇单甲醚酯2.40g和DMF 30mL，充分搅拌溶解，室温下反应24小时，反应过程中TLC跟踪；反应结束后向反应液中加入水，然后用二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，硅胶柱分离，得到淡黄色固体即为中间体1；

(2)Lyso-MCO的合成

称取1.412g中间体1、0.33g 4-甲氧基苯乙炔、5.6mg Pd(OAc)2、19.1mg CuI、26.2mg P(C6H5)3、30mL DMF以及6mL Et3N于烧瓶中，在N2保护下110℃反应2天，反应液过滤除去催化剂和不溶物，减压蒸馏除去DMF和Et3N，CH2Cl2萃取，硅胶柱分离，收集得到淡黄色固体Lyso-MCO；

(3)Lyso-NCO的合成

称取1.412g中间体1、0.36g 4-乙炔基-N,N-二甲基苯胺、5.6mg Pd(OAc)2、19.1mg CuI、26.2mg P(C6H5)3、30mL DMF以及6mL Et3N于烧瓶中，在N2保护下110℃反应2天，反应液过滤除去催化剂和不溶物，减压蒸馏除去DMF和Et3N，CH2Cl2萃取，硅胶柱分离，收集得到墨绿固体Lyso-NCO。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

步骤(1)中，硅胶柱分离时的洗脱液为石油醚/乙酸乙酯＝6/1，v/v。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

步骤(2)中，硅胶柱分离时的洗脱液为V(PE)/V(CH2Cl2)＝14:1。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

步骤(3)中，硅胶柱分离时的洗脱液为V(PE)/V(CH2Cl2)＝13:1。

6.一种权利要求1所述的双光子荧光染料的用途，其特征在于：所述双光子荧光染料在活细胞成像时作为溶酶体示踪剂使用。