[发明专利]一种高寒草地牧草内生细菌枯草芽孢杆菌菌株、微生物菌剂及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种一种高寒草地牧草内生细菌枯草芽孢杆菌菌株、微生物菌剂及其制备方法和应用，属于微生物领域，以解决现有化学农药环保性差、易产生抗药性以及安全性差的问题。一种枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)QLY004，CGMCC No.13048，分离自极端环境条件下的高寒草地针茅体内，具有抑制病原菌的能力。本发明枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)QLY004为内生菌，一方面由于内生枯草芽孢杆菌可定殖于植物体内，受外界环境影响小，生防作用稳定持久，甚至通过种子等途径传播于下一代，另一方面本发明内生枯草芽孢杆菌不仅对番茄灰霉病菌和番茄枯萎病菌等病原真菌有拮抗作用，可以一菌多防。

技术领域

本发明属于微生物领域，具体涉及一种内生枯草芽孢杆菌菌株、菌剂及其制备方法和应用。

背景技术

随着社会发展，人们对食品安全性的要求越来越高，但是，化学农药对环境的污染和农药残留等问题，植物病害的生物防治成为了研究热点，其中尤以植物内生细菌作为拮抗菌的研究得到众多学者的观注。植物内生细菌是指生活在植物体内，但对植物没有任何实质性伤害的细菌，其具有多种生物学功能，特别是抑菌功能使其成为生防菌资源的有力支撑。植物内生细菌除可以通过分泌抑菌物质及与病原菌竞争营养空间等直接作用与病原菌外，还可以诱导植物获得抗病性阻止对植物的侵染或造成的危害。以拮抗内生细菌为菌种资源研制的微生物农药不易产生抗药性，不伤害天敌，且能利用农副产品等广泛生产，更重要的是内生细菌可以定殖于作物体内，甚至可以通过种子(苗木)传播于下一代，长期起作用，省时省力，高效，应用于农业生产后为生产绿色或无公害农产品提供了一个新的途径。

中国作为番茄栽培大国，番茄果实及其加工产品用于鲜食和出口，然而番茄病害同样为其生产带来了显著影响，特别是近年来番茄丁香假单胞叶斑病在番茄栽培区有快速蔓延趋势，给生产造成较大的损失。目前，对于该病害的防治主要通过选育抗病品种以及喷施化学药剂的方式，但农业防治方法耗时耗力，见效慢，且防治效果不太理想，而长期进行化学防治将对人畜和生态环境等的安全造成严重威胁，特别是农药残留影响鲜食番茄的安全性。所以，既高效又安全的生物防治方法迅速引起了国内外学者的关注。

枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属中最常的一个种，其数量多，且很多菌株具有抑菌功能，现有枯草芽孢杆菌报道的是该菌株对香蕉枯萎病菌、棉花枯萎病菌、棉花黄萎病菌和西瓜枯萎病菌等具有良好抑制作用，但对于番茄病害尚无报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种高寒草地牧草内生细菌枯草芽孢杆菌菌株。

本发明的第二个目的是提供一种微生物菌剂，以解决现有化学农药环保性差、易产生抗药性以及安全性差的问题。

本发明的第三个目的是提供了一种微生物菌剂的制备方法。

本发明的第四个目的是提供了一种微生物菌剂的应用。

为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为：一种枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)QLY004，CGMCC No.13048，分离自极端环境条件下的高寒草地针茅体内，具有抑制病原菌的能力。

优选地，所述病原菌包括有番茄丁香假单胞叶斑病菌(Pseudomonas syringapv.tomato)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)和番茄枯萎病菌(Fusarium.oxysporum)。

一种微生物菌剂，其活性成分为权利要求1所述枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)QLY004的菌体，菌株QLY004的活菌数为2.48×10¹⁰CFU/mL-6.43×10¹²CFU/mL。

优选地，菌株的活菌数为4.65×10¹²CFU/mL。

优选地，所述微生物菌剂中草芽孢杆菌菌株QLY004的重量百分含量为10-18％，余量为培养基。