[发明专利]一种使用高效液相色谱纯化比伐卢定的方法

说明书

本发明公开了一种分离纯化比伐卢定的方法。采用高效液相色谱系统，以C18作为固定相，醋酸水溶液和乙腈为流动相，分离制备比伐卢定纯品。本发明操作简单，分离效果好，目的产品纯度达95%以上。

技术领域

本发明涉及一种比伐卢定的纯化方法，属于抗凝药的工业制备领域。

背景技术

比伐卢定，英文名称为 Bivalirudin，白色晶体粉末，无臭，无味，易溶于乙腈水溶液中，可用于预防血管成型介入治疗不稳定性心绞痛,前后的缺血性并发症，目前一般采用低压柱色谱和结晶的方式纯化比伐卢定纯品，但生产效率及收率较低，成本高，无法满足工业化大规模生产的需求。

高压制备液相色谱，一种使用高压、大流量输送系统在高分辨率、大内径、高载量分离柱上进行样品高纯度分离的液相色谱制备方法，可用于大规模高纯度地分离制备某种药物单一有效组分，本发明提供一种采用高压制备液相色谱分离制备比伐卢定纯品的方法，产品制备成本低，产品纯度以及纯品产率高。

发明内容

为解决以上技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种分离纯化比伐卢定的方法，具体步骤为：（1）用20%的乙腈水溶液溶解比伐卢定粗品，微孔滤膜过滤；（2）配制0.2%的醋酸水溶液和乙腈作为流动相备用；（3）用高效液相色谱系统对过滤后的粗品进行分离纯化，以C18为固定相，填料粒度5~75 μm，醋酸水溶液：乙腈=80：20为流动相进行洗脱，紫外检测器检测，收集目的馏分；（4）将收集到的目的馏分经旋转蒸发仪处理后，得到白色粉末即为比伐卢定纯品。

本发明具有以下技术效果：使用醋酸水溶液和乙腈做流动相，有机溶剂的使用量较少，减小了环境污染，且使用高效液相色谱纯化得到的比伐卢定纯度高达95%以上，制备过程简单，易于操作。

具体实施方式

实施例1

使用20%乙腈水溶液溶解比伐卢定粗品， 0.45 μm的微孔滤膜过滤，C18作为固定相，填料粒度为20 μm，以0.2%醋酸水溶液：乙腈=80:20的流动相体系平衡系统20 min，上样，洗脱约30 min后开始接收目标组分，接收约20 min，将收集到的目的馏分经旋转蒸发仪处理后，得到白色粉末即为比伐卢定纯品，经检测，纯度为95.2%。

实施例2

使用20%乙腈水溶液溶解比伐卢定粗品， 0.45 μm的微孔滤膜过滤，C18作为固定相，填料粒度为50 μm，以0.2%醋酸水溶液：乙腈=85:15的流动相体系平衡系统15 min，上样，洗脱约25 min后开始接收目标组分，接收约17 min，将收集到的目的馏分经旋转蒸发仪处理后，得到白色粉末即为比伐卢定纯品，经检测，纯度为95.4%。

实施例3

使用20%乙腈水溶液溶解比伐卢定粗品， 0.45 μm的微孔滤膜过滤，使用C18作为固定相，填料粒度为60 μm，以0.3%醋酸水溶液：乙腈=75:25的流动相体系平衡系统20 min，上样，洗脱约35 min后开始接收目标组分，接收约22 min，将收集到的目的馏分经旋转蒸发仪处理后，得到白色粉末即为比伐卢定纯品，经检测，纯度为95.1%。