[发明专利]一种相思开放式组培方法

说明书

本发明公开一种相思开放式组培方法。该方法包括如下步骤：取4～10月份当年生腋芽饱满枝条为外植体，消毒，然后在开放式芽诱导培养基中进行培养，得到腋芽；将腋芽在开放式生根培养基中进行开放式瓶内生根培养，得到生根苗；将生根苗剪成具有至少一个芽的小节为继代外植体，继续在开放式生根培养基中进行培养，连续多代生根实现增殖的目的。本发明使用的抑菌剂百菌清，成分简单、成本低、易于购买，0.2g·L^‑1即可达到良好抑菌效果，通过对外植体类型、消毒方式、外植体采集季节、芽诱导培养基等筛选研究，芽诱导率高达99.54％；生根率97.62％，连续多代生根的增殖倍数可达3.58，完全可满足工厂化生产需求。

技术领域

本发明属于植物组培技术领域，特别涉及一种相思开放式组培方法。

背景技术

无性繁殖能最大限度保持其优良母株的优良性状，利于优树优良性状的固定，从而利于良种快速扩繁、推广应用。扦插和组培是目前应用最广泛的两种林木快繁技术。许多树种已能通过扦插技术进行大量苗木的快繁，该技术虽然操作简单、容易掌握，但需要较大面积的土地来营建采穗圃以提供插条，而现今土地资源严重紧缺，使得该技术的推广应用受到极大的限制；另外，仍有不少树种扦插生根困难，无法以该方式获得大量苗木。组培技术不受环境和季节的限制，繁殖后代的性状与母本保持完全一致，组培苗生长周期短，对采穗圃的面积要求较小，能在有限的时间和空间内高质量、高产量地发展林木种苗生产，促进良种质资源的保存、利用以及推广种植。

但传统组培技术存在褐化率高，易出现玻璃化现象，污染率高，成本较高等难题。新的组培技术为解决组培难题提供了新思路，但又存在一些新的亟待解决的问题。

光自养培养技术由于特殊培养容器及光照条件的应用，改善了组培苗的培养环境，使得组培苗的生长更接近于自然生长，利于降低玻璃化现象，简化了驯化过程，一定程度上改善了组培技术，但其仍未脱离无菌操作，同时一般生产环境难以满足其特殊培养条件，使得组培成本实际上并未降下来。

开放组培技术又进一步着眼于组培技术的简化，致力于组培无菌操作的变革，不再强调培养环境的绝对无菌状态，从培养基自身的抑菌能力入手，省去了高温高压灭菌步骤和超净工作台的使用，从耗电和操作步骤方面降低了组培成本。但目前的研究还尚未建立完善的技术体系，存在的主要问题是：使用的抑菌剂成分复杂、不易获取(人工提取或者成本较高)、效果不佳，不利于推广应用。

发明内容

为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的目的在于提供一种相思开放式组培方法。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种相思开放式组培方法，包括如下步骤：

(1)取4～10月份当年生腋芽饱满枝条为外植体，消毒，然后在开放式芽诱导培养基中进行培养，得到腋芽；

(2)将步骤(1)得到的腋芽在开放式生根培养基中进行开放式瓶内生根培养，得到生根苗；

为了更好的实现本发明的目的，还包括：

(3)将步骤(2)的生根苗剪成具有至少一个芽的小节为继代外植体，继续在开放式生根培养基中进行开放式瓶内生根培养，连续多代生根实现增殖的目的。

所述的相思为马大杂种相思(A.mangium×A.auriculiformis)、马占相思(A.mangium)或大叶相思(A.auriculiformis)；优选为马大杂种相思(A.mangium×A.auriculiformis)。

将4～10月份当年生腋芽饱满枝条，洗衣粉水浸泡，刷净后流水冲洗，剪成长2.0～3.0cm带腋芽的茎段。优选取中部带叶茎段(即第3～5腋芽带叶茎段)。

所述的洗衣粉水浸泡的时间优选为10～60min；所述的流水冲洗的时间优选为1～3h。