[发明专利]粘质沙雷氏菌及其应用

权利要求书

1.粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)ZJB-16006，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC No：M 2017033，保藏日期2017年01月13日，地址：中国，武汉，武汉大学，430072。

2.一种权利要求1所述粘质沙雷氏菌ZJB-16006在催化2-氨基-4(羟乙基甲基磷酰基)-丁腈制备L-2-氨基-4(羟乙基甲基磷酰基)-丁酸中的应用，其特征在于所述2-氨基-4(羟乙基甲基磷酰基)-丁腈结构式为：

所述L-2-氨基-4(羟乙基甲基磷酰基)-丁酸结构式为：

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述的应用为：以粘质沙雷氏菌ZJB-16006经发酵培养获得的湿菌体为催化剂，以2-氨基-4(羟乙基甲基磷酰基)-丁腈为底物，以蒸馏水或100mM、pH 7.0磷酸缓冲液为反应介质，在30-50℃、100-200rpm条件下进行转化反应，反应结束，将反应液分离纯化，获得L-2-氨基-4(羟乙基甲基磷酰基)-丁酸。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述催化剂用量以湿菌体重量计为20-100g/L反应介质，所述底物初始加入终浓度为2-10g/L反应介质。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述催化剂按如下方法制备：(1)斜面培养：将粘质沙雷氏菌ZJB-16006接种至斜面培养基，在30℃培养48h，获得斜面菌体；所述斜面培养基终浓度组成为：甘露醇1～20.0g/L，谷氨酸钠1～10.0g/L，酵母膏1～5.0g/L，K₂HPO₄ 0.1～1.0g/L，KH₂PO₄0.1～1.0g/L，MgSO₄ 0.1～1.0g/L，己内酰胺0.1～2.0g/L，琼脂20.0g/L，溶剂为去离子水，pH 7.0-7.5；

(2)种子培养：挑取斜面菌体接种至种子培养基，在30℃培养24h，获得种子液；所述种子培养基终浓度组成为：甘露醇1～20.0g/L，谷氨酸钠1～10.0g/L，酵母膏1～5.0g/L，K₂HPO₄ 0.1～1.0g/L，KH₂PO₄ 0.1～1.0g/L，MgSO₄ 0.1～1.0g/L，己内酰胺0.1～2.0g/L，溶剂为去离子水，pH 7.0-7.5；

(3)发酵培养：将种子液以体积浓度1％的接种量接种至发酵培养基中，30℃，150rpm振荡培养48h后，在12000g下离心10min，收集湿菌体；所述发酵培养基终浓度组成为：甘露醇1～20.0g/L，谷氨酸钠1～10.0g/L，酵母膏1～5.0g/L，K₂HPO₄ 0.1～1.0g/L，KH₂PO₄0.1～1.0g/L，MgSO₄ 0.1～1.0g/L，己内酰胺0.1～2.0g/L，溶剂为去离子水，pH 7.0-7.5。

6.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述反应液分离纯化的方法为：将反应液调至pH 2.5，采用阴离子交换树脂201×7进行柱层析，以上柱流速为1～6.0BV/h进行上样，先用去离子水洗涤，再用0.5～2.0M的氨水进行洗脱，洗脱速度为1.0～4.0BV/h，收集含有目标物的洗脱液；将洗脱液减压蒸馏至无溶剂流出，加入甲醇溶解，在冰浴下搅拌，重结晶，过滤，滤饼干燥，即得产物L-2-氨基-4(羟乙基甲基磷酰基)-丁酸。