[发明专利]细胞分离制片染色一体装置和循环肿瘤细胞捕获方法

权利要求书

1.一种细胞分离制片染色一体装置，其特征在于，包括基材以及沿第一方向延伸于基材内的沟道，所述沟道位于第一方向的两端分别形成有样品入口和样品出口，所述沟道内并列设置有n排微柱阵列，n≥2，每排所述微柱阵列沿第二方向延伸，所述第二方向垂直于所述第一方向，每排所述微柱阵列分别包括间隔设置的多个微柱，相邻所述微柱之间形成有捕捉间隙，并满足：

(a)、自样品入口至样品出口方向，第x排微柱阵列的捕捉间隙＞第x+1排微柱阵列的捕捉间隙，1≤x＜n；

(b)、第n排微柱阵列的捕捉间隙小于循环肿瘤细胞的外径。

2.根据权利要求1所述的细胞分离制片染色一体装置，其特征在于：所述基材包括上下叠加设置的聚二甲基硅氧烷和标准载玻片，所述沟道形成于聚二甲基硅氧烷和标准载玻片之间。

3.基于权利要求1或2所述的细胞分离制片染色一体装置的循环肿瘤细胞捕获方法，其特征在于，包括步骤：

(1)、采用红细胞裂解液裂解肿瘤病人血样中的红细胞，离心吸取上清液，用细胞缓冲液重悬剩余细胞；

(2)、将获得的细胞悬液从样品入口通入微流控芯片中，完成循环肿瘤细胞的捕获。

4.根据权利要求3所述的循环肿瘤细胞捕获方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的细胞裂解液为红细胞裂解液。

5.根据权利要求3所述的循环肿瘤细胞捕获方法，其特征在于，步骤(1)中，细胞缓冲液为牛血清白蛋白和tewwn20的磷酸缓冲液。

6.根据权利要求3所述的循环肿瘤细胞捕获方法，其特征在于，步骤(2)中，细胞固定液为4％多聚甲醛水溶液。

7.根据权利要求3所述的循环肿瘤细胞捕获方法，其特征在于，还包括循环肿瘤细胞荧光染色步骤：

(3)、将细胞透膜液通入微流控芯片中，对细胞进行透膜；将细胞清洗液通入微流控芯片，对透膜后的细胞进行清洗；将免疫荧光染料通入微流控芯片中，避光孵育，对细胞进行免疫荧光染色；将细胞核染料通入微流控芯片中，静置，对细胞核进行染色；将细胞清洗液通入微流控芯片，对染色后的细胞进行清洗。

8.根据权利要求7所述的循环肿瘤细胞捕获方法，其特征在于，所述细胞透膜液为表面活性剂TritonX100水溶液。

9.根据权利要求7所述的循环肿瘤细胞捕获方法，其特征在于，所述细胞清洗液为磷酸缓冲液。

10.根据权利要求7所述的循环肿瘤细胞捕获方法，其特征在于，所述的免疫荧光染料为抗细胞角蛋白荧光染料和白细胞共同抗原染料；所述的细胞核染料为Hoechst染料。